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miR-27a、miR-146a在骨性关节炎患者滑膜组织中的表达及临床意义

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前言

材料与方法

1. 材料

1.1 标本来源及分组

1.2 主要试剂

1.3 主要仪器及耗材

2. 实验方法及原理

2.2总RNA 的提取

2.3总RNA浓度及纯度的检测

2.4总RNA完整性的检测

2.5逆转录生成cDNA

2.6实时荧光定量PCR检测miRNA-146a、miRNA-27a及U6

3 实验数据处理及统计学分析

结 果

1 提取总RNA完整性的检测

2 miR-27a、miR-146a在滑膜组织中的相对表达情况

2.1 实时荧光定量PCR检测目的基因的表达

2.2 滑膜组织中mir-27a、mir-146a和U6的扩增曲线

2.3 miR-27a、miR-146a的表达与骨性关节炎疾病的相关性

讨 论

一 骨性关节炎

二 microRNAs与骨性关节炎

三 骨性关节炎滑膜组织病变

四 microRNA在骨性关节炎滑膜组织病变中的研究

结 论

参 考 文 献

附表

文献综述

致谢

作者简介

石河子大学硕士研究生学位论文

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摘要

目的:通过检测骨性关节炎患者(OA)与非骨性关节炎患者滑膜组织中miRNA-27a和miRNA-146a的表达情况,探讨miRNA-27a和miRNA-146a与该疾病的相关关系。
  方法:通过收集石河子大学第一附属医院骨一科2011年11月至2012年3月的临床OA患者滑膜组织23例,非OA患者滑膜组织23例,应用实时荧光定量聚合酶链反应(qPT-PCR)检测滑膜组织中miRNA-27a和miRNA-146a的相对表达量,分析滑膜组织中miRNA-27a和miRNA-146a的表达水平与骨性关节炎疾病的相关关系,实验所得数据采用均数±标准差(x±s)表示,采用sPssl7.0统计软件进行统计分析,组间比较采用独立样本t检验,以P<0.05有统计学意义。
  结果:(1)所有的滑膜组织中的miR-27a和miR-146a均能检测到,且扩增曲线良好,扩增效率较高。(2)骨性关节炎患者滑膜组织中miRNA-27a和miRNA-146a相对表达量分别为:1.91?1.74、1.16?1.93,非骨性关节炎患者滑膜组织中的相对表达量分别为:0.91?1.19、0.13?1.35,根据qRT-PC原理,ΔCt值越高其目的基因在相应组织中的表达水平越低,即骨性关节炎患者滑膜组织的miRNA-27a和miRNA-146a的表达水平较对照组呈低表达趋势,组间比较P值均小于0.05,用统计学意义。
  结论:miR-27a和miR-146a在骨性关节炎患者滑膜组织中的表达对比非骨性关节炎患者存在差异性表达,表现为显著下调趋势,miR-27a和miR-146a表达的改变与骨性关节炎滑膜组织病变的发生发展有关。

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