上皮生长因子受体信号对维持表层关节软骨及抑制骨关节炎进展的作用

摘要

背景/目的:
　　研究上皮生长因子受体（EGFR）信号在转基因及手术造模小鼠的关节软骨发育和骨关节炎（OA）发生发展中的作用。
　　方法:
　　建立Egfr软骨特异性敲除小鼠（CKO）。通过组织学、免疫组化、纳米压痕及microCT技术检测基因敲除组及其对照组的内侧半月板游离（DMM）术侧及假手术侧膝关节。使用原代软骨细胞研究活化EGFR对软骨细胞的直接作用。通过建立计算机仿真模型计算DMM术后软骨下骨板（SBP）的压力负荷。
　　结果:
　　EGFR在人及小鼠的关节软骨皆有表达且其活性主要集中于在表层。与对照组相比，成年CKO小鼠关节软骨有更低的表层软骨细胞数、软骨面硬度及边界Prg4分泌量，且具有早期OA症状及表型。组织培养中，活化的EGFR对维持软骨细胞数量、抑制细胞肥大及促进Prg4表达有至关重要的作用。DMM术后，CKO小鼠很快产生最严重的OA表型，包括关节内侧软骨完全缺失及剧烈关节疼痛。由于压力负荷增加引起骨硬化素减少而导致的骨形成增多，DMM术后CKO小鼠关节在软骨损伤区域产生软骨下骨硬化。
　　结论:
　　EGFR信号对关节软骨稳态及OA发展至关重要。机械负荷介导OA局部软骨损伤与软骨下骨板的相互关联。

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前言

材料及方法

1. 转基因小鼠杂交培育及基因鉴定

2. 组织学

3. 免疫组化染色

4. 人关节软骨标本

5. 纳米压痕（Nanoindentation）

6. 原代软骨细胞培养

7. 基因水平的检测——RT-qPCR

8. 骨量检测——Micro-CT

9. OA疼痛测试

10. 蛋白质印迹实验（Western blot）

11.酶联免疫吸附测定（ELISA）

12.统计学分析

结果

1. 关节软骨中EGFR及其配体的表达情况

2. EGFR信号在健康及早期骨关节炎关节软骨中的表达变化

3. 软骨细胞内EGFR信号缺失导致异常关节软骨发育

4. EGFR在维持关节表层软骨细胞及其功能中发挥关键作用

5. 软骨细胞内EGFR缺失急剧加速OA小鼠模型关节软骨损伤

6. 骨硬化蛋白（Sclerostin ）含量降低导致Egfr CKO小鼠软骨下骨板(SBP)增厚

7. 软骨EGFR缺失小鼠关节软骨损耗增加软骨下骨板压力负荷

讨论

结论

参考文献

综述

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