阿拉山口口岸常见媒介生物本底调查及携带病原谱检测研究

摘要

目的：对阿拉山口口岸地区常见的媒介生物鼠、蚤、蠓、蚊和蜱进行本底调查和虫媒病监测，建立口岸地区媒介生物“DNA条形码”物种鉴定平台，解析阿拉山口口岸地区鼠、蚤、蠓、蚊和蜱携带传染病病原谱，为阐述重要疾病在人-宿主-媒介中的传播机制和重要媒介源传染病跨种/跨境传播规律奠定基础，同时为口岸地区虫媒传播动物疫病的风险评估提供基础资料。
　　方法：（1）采用鼠笼法、鼠夹法、网捕法、灯诱法、白布旗法和动物体表采集法等方法采集鼠、蚤、蠓、蚊和蜱。（2）采用形态学、分子生物学方法对采集的媒介生物进行种类鉴定，并进行基因序列系统发育分析。（3）采用血清学和分子生物学技术对非洲猪瘟、蓝舌病、水泡性口炎、莱姆病、无形体和埃立克体等虫媒病进行病原检测，对PCR阳性产物进行测序并登录Genbank数据库Blast分析，使用Mega6.0构建分子遗传进化树，进行系统发育分析。
　　结果：（1）采集鼠类样本4属9种384只，蚤类7种431只，蠓1属1种24017只，蚊4属10种27128只，蜱2科5属8种1336只。（2）分析并获取灰仓鼠和子午沙鼠COI基因序列，大沙鼠、灰仓鼠和西伯利亚五趾跳鼠16S rRNA基因序列，臀突客蚤线粒体COI和COII基因序列，凶小库蚊16S rRNA和ITS基因序列，里海伊蚊16S rRNA、28S rRNA和Cytb基因序列；短垫血蜱的16S rDNA， COI，12SrRNA，ITS基因序列，且分子生物学鉴定结果与形态学鉴定不符。（3）大沙鼠嗜吞噬细胞无形体核酸阳性率为3.39％；42.9%的臀突客蚤中检测到未定型的立克次体核酸；凶小库蚊沃尔巴克氏体核酸检出率为3.33%；在蜱中检测到伯氏疏螺旋体、埃立克体、无形体、斑点热群立克次体、Q热和巴贝斯虫核酸，阳性率分别为45.44%、14.95%、11.26%、12.04%、17.48%和12.82%。
　　结论：（1）在阿拉山口口岸地区首次采集到迷走按蚊、阿拉斯加脉毛蚊、带棒按蚊、图兰扇头蜱和囊形扇头蜱。大沙鼠、臀突客蚤、原野库蠓、凶小库蚊、亚洲璃眼蜱和边缘革蜱为优势种。（2）鼠、蚤、蚊和蜱进行分子信息研究，其中灰仓鼠和子午沙鼠COI基因序列，大沙鼠、灰仓鼠和西伯利亚五趾跳鼠16S rRNA基因序列，臀突客蚤线粒体COI和COII基因部分序列，凶小库蚊16S rRNA和ITS基因序列，里海伊蚊16S rRNA、28S rRNA和Cytb基因序列和短垫血蜱的16S rDNA、COI、12SrRNA、ITS基因序列信息在国际上首次进行报道。（3）在阿拉山口口岸检测到沃尔巴克氏体、嗜吞噬粒细胞无形体、伯氏疏螺旋体、绵羊无形体、未定型埃立克体、Q热、饶氏立克次体、隐藏巴贝斯虫、弩巴贝斯虫和未定型巴贝斯虫核酸。在短垫血蜱中检测到嗜吞噬细胞无形体、饶氏立克次体和未定型的巴贝斯虫，提示虎鼬可能是无形体、立克次体和巴贝斯虫的潜在宿主。（4）阿拉山口口岸地区存在多种虫媒病，为多种虫媒病的自然疫源地，对野生动物、候鸟和旅客造成潜在危害。

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前言

第一章 媒介生物的分类学研究及虫媒病综述

1媒介生物的鉴定方法

2 常见的虫媒病

参考文献

第二章 鼠的本底调查及鼠传疾病的检测

1材料与方法

2结果

3讨论

参考文献

第三章 蚤的本底调查及蚤传疾病的检测

1材料与方法

2结果

3讨论

参考文献

第四章 蠓的本底监测与蠓传疾病的检测

1材料与方法

2结果

3讨论

参考文献

第五章 蚊的本底调查和蚊传病的检测

1材料与方法

2结果

3讨论

参考文献

第六章 蜱的本底调查和蜱传疾病的检测

1材料与方法

2结果

3讨论

参考文献

结论

创新点

附录

致谢

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