EPCs联合胚胎鼠跖骨血管生成实验模型的建立

摘要

目的：
　　⑴在胚胎鼠跖骨血管生成实验基础上，引入外源性的内皮祖细胞（EPCs），建立一种新型体外血管生成模型。研究者可通过此实验模型直接观察EPCs对胚胎鼠跖骨血管生成的影响，并借助于此实验模型可以更好地筛选或反应不同实验目标对EPCs活性的促进或抑制作用。⑵探讨EPCs联合胚胎鼠跖骨血管形成实验模型中加入的EPCs的最适数量、模型的最适共培养时间。
　　方法：
　　①分离、培养及扩增来源于6-8周龄的C57BL/6小鼠骨髓的内皮祖细胞（EPCs）；②从孕17.5天C57BL/6小鼠中分离提取胚胎鼠，无菌条件下将胚胎鼠跖骨取出；③分别将数量为5×103、1×104、5×104、1×105的EPCs与胚胎鼠跖骨进行时间分别为12天、14天、16天的联合培养，并设空白对照组；④CD31对胚胎鼠跖骨周围芽生管样结构进行免疫染色；⑤用Image-Pro Plus6.0对免疫染色阳性结果图像区域进行量化；⑥SPSS17.0分析处理数据并进行统计学分析。
　　结果：
　　⑴利用全骨髓贴壁法结合差时贴壁法可有效分离和扩增EPCs细胞。⑵EPCs联合胚胎鼠跖骨血管生成实验模型的最适共培养时间为14天。⑶EPCs联合胚胎鼠跖骨血管生成实验模型中加入的EPCs相对最适数量为5×104。
　　结论：
　　构建了EPCs联合胚胎鼠跖骨血管生成实验模型，并实现对EPCs活性进行定量检测。

目录

声明

英文缩略语表

前言

材料与方法

1 实验材料

1.1 实验所需的动物

1.2 主要试剂与药品

1.3 主要仪器设备

1.4 主要试剂的配制

2 实验方法

2.1 骨髓内皮祖细胞(BM-EPCs)的分离、培养及传代

2.2 构建EPCs联合胚胎鼠跖骨血管生成实验模型

3 统计学分析

4 技术路线

结果(Results)

1 内皮祖细胞（EPCs）的形态观察

2 EPCs联合胚胎鼠跖骨血管生成实验模型的构建

2.1共培养时间对胚胎鼠跖骨芽生血管样结构的影响

2.2 不同EPCs数量对胎鼠跖骨芽生血管面积的影响

讨论

结论

参考文献

综述:体内外血管生成实验模型研究进展

致谢

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