兔动脉粥样硬化病变中炎症介质的表达及其可能机制

摘要

目的：在成功建立实验兔动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)模型的基础上，观察实验兔主动脉壁核因子-kappaB(nuclearfactor-kappaB，NF-κB)、肿瘤坏死因子-alpha(tumornecrosisfactor-alpha，TNF-α)、血管细胞间粘附分子-1(vascularcelladhesionmolecule-1，VCAM-1)及基质金属蛋白酶-2(matrixmetalloproteinase-2，MMP-2)水平的变化，以探讨上述炎症介质之间的相互关系以及在AS病变形成中的作用机制。 方法：健康新西兰雄性白兔18只，3月龄，体重1.8-2.4kg,按清洁级动物分笼喂养，适应性喂养一周，称重后随机分为2组：(1)正常对照组(n=6，简称对照组)给予普通饲料喂养；(2)高脂加损伤组(n=12简称模型组)给予普通饲料加高脂饲料喂养(1％胆固醇+10％蛋黄粉+5％猪油)，高脂饲料喂养2周后，全麻钝性分离并切开左股动脉，结扎远端，近端在导丝导引下逆行插入PTCA球囊导管(直径4.0mm)，插入深度为15cm，8atm，往返回拉球囊3次损伤血管内皮，撤出导管和导丝，结扎股动脉并缝合伤口，青霉素10万U/kg肌注预防感染，继续高脂饲料喂养。上述动物共喂养12周，并于0、12周空腹耳缘静脉采血。测定血清总胆固醇(totalcholesterol，TC)、甘油三酯(triglyceride，TG)、低密度脂蛋白胆固醇(lowdensitylipoprotein-cholesterol，LDL-C)、高密度脂蛋白(highdensitylipoprotein-cholesterol，HDL-C)水平。将主动脉从根部分离至腹主动脉分叉处离断，主动脉根部至主动脉弓置于-80℃低温冰箱保存；取球囊损伤处主动脉，4％多聚甲醛液中固定3h，石蜡包埋。应用免疫组织化学染色检测不同组别主动脉壁VCAM-1和MMP-2的表达。应用RT-PCR检测不同组别主动脉NF-κBmRNA和TNF-αmRNA的表达。 结果：体重和血脂：经过12周的喂养后，对照组、模型组体重均较自身基础水平增高。模型组TC、TG、LDL-C、HDL-C较自身基础水平和对照组显著升高(p<0.05)。病理学观察：大体对照组兔主动脉壁薄，有韧性，不易拉断，内膜光滑，无AS斑块形成。模型组血管壁变厚，脆性增加，易拉断，内膜呈灰白色，明显斑块形成，甚至表面有破溃。光镜下，对照组主动脉壁各层结构完整，内膜光滑、连续，内皮完整，无泡沫细胞形成；模型组血管内膜明显增厚，内膜中有大量炎性细胞浸润、泡沫细胞聚集，重者可见核心坏死及胆固醇结晶。免疫组化结果：模型组斑块内MMP-2表达水平较对照组显著升高(p<0.05)；模型组斑块内VCAM-1表达为阳性，对照组则为阴性。RT-PCR结果：正常组兔主动脉壁仅见微量NF-κBmRNA表达，未见TNF-αmRNA表达，而在模型组动脉壁可见到大量NF-κBmRNA和TNF-αmRNA表达。 结论：模型组实验兔主动脉VCAM-1，NF-κB，TNF-α，MMP-2等炎症因子表达显著增高，表明它们很可能参与AS病变的形成并起了重要作用。

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文摘

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前言

研究现状、成果

研究目的、方法

对象和方法

结果

讨论

小结

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

附录

综述 动脉粥样硬化炎症机制研究进展

致谢