STAT3抑制剂抑制裸鼠大肠癌生长机制的研究

摘要

目的：为进一步研究大肠癌生长机制和探索新的治疗方法，建立裸鼠结肠癌动物模型，应用信号转导和转录活化因子3(STAT3)抑制剂WP1066进行干预，测定裸鼠种植瘤组织中STAT3、血管内皮生长因子C(VEGF-C)、血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)的表达情况。同时检测podoplanin、Ki67蛋白表达，分析其相互关系，探讨它们在大肠癌生长、转移中的作用。
　　 方法：培养结肠癌HCT-116肿瘤细胞，建立BABL/c裸鼠动物模型，分三组进行干预实验(空白对照组、阴性对照组、实验组)，采用荧光实时定量PCR的方法检测三组裸鼠结肠癌种植瘤的STAT3、VEGF-C、VEGFR-3的mRNA转录水平，采用免疫组织化学方法对组织切片进行染色检测其p-STAT3、VEGF-C、VEGFR-3蛋白表达情况，同时检测podoplanin、Ki67蛋白表达水平，分析上述指标之间的关系。
　　 结果：空白对照组的肿瘤体积与阴性对照组的肿瘤体积大小差异无统计学意义(p>0.05)，实验组的肿瘤体积小于以上两组的肿瘤体积，差异具有统计学意义(p<0.05)。
　　 空白对照组肿瘤组织的STAT3、VEGF-C、VEGFR-3mRNA转录水平相比阴性对照组差异无统计学意义(p>0.05)。实验组肿瘤组织的STAT3、VEGF-C、VEGFR-3mRNA转录水平显著低于空白对照组和阴性对照组(p<0.05)，差异具有统计学意义。
　　 空白对照组肿瘤组织的p-STAT3、VEGF-C、VEGFR-3、podoplanin、Ki67蛋白表达相比阴性对照组差异无统计学意义。实验组肿瘤组织的p-STAT3、VEGF-C、VEGFR-3、podoplanin、Ki67蛋白表达著低于空白对照组和阴性对照组，差异具有统计学意义。
　　 种植瘤组织中STAT3分子mRNA转录水平、p-STAT3蛋白表达与VEGF-C分子mRNA转录水平、蛋白表达呈正相关(P<0.05)；VEGF-C分子mRNA转录水平、蛋白表达与VEGFR-3分子mRNA转录水、蛋白表达呈正相关(P<0.05)。
　　 种植瘤组织中p-STAT3蛋白表达与podoplanin呈正相关(P<0.05)；VEGFR-3蛋白表达与podoplanin呈正相关(P<0.05)。
　　 结论：STAT3抑制剂WP1066能够减慢HCT-116裸鼠种植瘤的生长速度；使STAT3 mRNA转录水平降低，p-STAT3蛋白表达降低，近而VEGF-C、VEGFR-3mRNA转录水平降低，VEGF-C、VEGFR-3蛋白表达降低；使podoplanin、Ki67蛋白表达减少，提示抑制STAT3能够抑制结肠癌HCT-116肿瘤的生长，STAT3是调节VEGF-C、VEGFR-3、podoplanin的上游基因。STAT3、VEGF-C、VEGFR-3的mRNA转录水平存在正相关，p-STAT3、VEGF-C、VEGFR-3的蛋白表达存在正相关，提示他们的相互作用诱导了肿瘤的生长和转移。p-STAT3、VEGFR-3蛋白表达水平与podoplanin蛋白表达之间存在正相关，提示STAT3、VEGFR-3能够调节podoplanin的生成。