二甲双胍对子宫内膜癌的抑制作用及其作用机制的体外研究

摘要

目的：⑴探讨二甲双胍对子宫内膜癌细胞（Ishikawa和ECC1细胞）增殖抑制作用。⑵探讨二甲双胍抑制子宫内膜癌细胞增殖的作用机制。
　　 方法：利用子宫内膜癌Ishikawa细胞和ECC1细胞进行实验。以MTT法检测不同浓度二甲双胍（0.5mmol/l，1mmol/l，5mmol/l，10mmol/l，15mmol/l，20mmol/l,25mmol/l，30mmol/l）对子宫内膜癌细胞的生长抑制作用;以Westernblotting法检测不同浓度二甲双胍对子宫内膜癌细胞GRP78蛋白表达的影响;以流式细胞技术检测不同浓度二甲双胍对子宫内膜癌细胞凋亡的影响。
　　 结果：①不同浓度二甲双胍（0.5mmol/l，1mmol/l，5mmol/l，10mmol/l，15mmol/l，20mmol/l，25mmol/l,30mmol/l）对子宫内膜癌细胞有生长抑制作用，并且具有浓度依赖性。Ishikawa细胞和ECC1细胞二甲双胍IC50值分别为(5.25±0.54)mmol/l和(3.28土0.23)mmol/l，提示ECC1细胞较Ishikawa细胞对二甲双胍的抑制作用更加敏感。②二甲双胍能降低Ishikawa和ECC1细胞GRP78的表达，并且具有浓度依赖性，二者之间差异有统计学意义(F=675.254，P=0.000，F=356.521，P=0.000)。在不同浓度二甲双胍作用下，两组细胞GRP78表达相比较，各组间具有统计学意义（从对照组到浓度30mmol/l组:t=33.675，P=0.00，t=11.139，P=0.00，t=22.518,P=0.00,t=13.898, P=0.00,t=9.912, P=0.001,t=8.216,P=0.001,t=5.000, P=0.007)。③不同浓度的二甲双胍可诱导子宫内膜癌细胞凋亡，其中Ishikawa细胞凋亡率分别为4.42％，6.97％，8.04％，10.87％，17.45％48.45％，53.8％;ECC1细胞凋亡率分别为11.69％，20.15％，23.11％，30.32％，35.56％，46.78％，83％。可见，二甲双胍诱导的ECC1细胞凋亡率比Ishikawa细胞凋亡率高，这可能是ECC1细胞较Ishikawa细胞对二甲双胍更加敏感的原因。
　　 结论：⑴二甲双胍有抑制子宫内膜癌细胞增殖的作用，而且具有浓度依赖性。⑵二甲双胍可能是通过降低子宫内膜癌细胞中GRP78表达和诱导肿瘤细胞凋亡等途径发挥抑制细胞增殖的作用。

目录

声明

摘要

Abstract

Contents

List of Abbreviations

1．Introduction

2．Methods and Materials

2．1 Cell culture and reagents used

2．2 Cell Culture

2．3 Cell proliferation assay

2．4 Western blotting

2．5 Flow eytometry

2．6 Statistical analysis

3．Results

3．1 Metformin Inhibits proliferation in Ishikawa and ECC1 cells in vitro

3．2 Metformin reduces the expression of GRP78 in Ishikawa and ECC1 cells

3．3 Metformin induces apotosis in Ishikswa and ECC1 cells

4．Discugsion

4．1 Role and mechanisms of ER stress and GRP78 in endometrial cancer

4．2 Mechanisms of metformin action on antineoplastic therapy

4．3 Role and mechanisms of metformin in endometrial cancer

5．Conclusion

Reference

Literature Review Advance of metformin anticancer and its mechanism in endometrial cancer

Acknowledgements