兔眼脉络膜上腔注射交联透明质酸的实验观察

摘要

目的：
　　本研究在巩膜外垫压及微创手术的概念指导下，探讨用微导管系统向兔眼脉络膜上腔注射交联透明质酸(cross-linked hyaluronic acid,CLHA)产生内垫压脉络膜视网膜效应的有效性和可行性，评估此手术方式和CLHA作为内垫压移植物的安全性，为视网膜脱离和近视性牵拉性黄斑病变等疾病的微创治疗提供新思路和相关实验基础。
　　方法：
　　选取27只健康成年黑兔，随机将其分3组，CLHA组（12只）脉络膜上腔注射交联透明质酸，HA组（12只）脉络膜上腔注射透明质酸，正常组（3只），眼内无任何填充物，作为空白对照。术前检查眼前后节排除眼部疾患。任选一眼作实验眼。手术显微镜下，以兔眼穹隆部为基底，于鼻上或颞上方作一梯形结膜瓣，角膜缘后5mm制作与其平行长3mm全层巩膜切口。27g平头微导管钝性分离巩膜与脉络膜，将硅胶微导管(27g)经巩膜切口插入脉络膜上腔，双目间接检眼镜直视下在靶点位置注射0.1～0.15ml CLHA或HA。术后1小时、1天、2天、3天、1周、2周、4周、8周分别行双目间接检眼镜、眼底照像、眼压及B型超声检查;术后1周、4周、8周行F-ERG检查，术后4周、8周行病理组织学检查。
　　结果：
　　1.眼底情况:A组、B组术后实验眼眼底均出现橙红色脉络膜视网膜隆起，形如穹隆，边界清晰，大小约5～7视盘直径，范围局限。玻璃体腔清，未见眼内炎症反应。随时间延长，A组隆起高度缓慢下降，范围逐渐缩小，局限原位，极少蔓延，术后8周时，范围约缩小一半。B组脉络膜隆起向周边扩散，24～72小时后，隆起区域几乎消失，脉络膜视网膜恢复原位。
　　2.并发症:脉络膜上腔注射手术时间不超过1小时，共进行手术32例，成功24例（了5％）。术中脉络膜出血1例，玻璃体脱出3例，脉络膜裂孔和视网膜裂孔3例，术后眼内炎1例。1例脉络膜下点片状出血，1周内吸收。6例术后结膜炎症，点抗生素滴眼液1周后恢复。
　　3.眼压:术后不同时间点(1h，1d，2d，3d，1w，2w，4w，8w)，A组、B组实验眼与对侧对照眼眼压分别进行配对t检验，结果显示各组试验眼与对照眼眼压的差异无统计学意义（P均＞0.05）。术后随访各时间点，A组和B组实验眼、C组正常对照眼眼压行单因素方差分析，结果显示各时间点三组之间眼压的差异均无统计学意义（P均＞0.05）。
　　4.B型超声:脉络膜上腔注射术后1小时，形成脉络膜脱离，表现为玻璃体腔暗区内出现一个强回声区界面，内部为低密度回声暗区，从球后壁向玻璃体腔内呈半球形隆起，边界清晰、光滑。随访8周，A组脉络膜脱离低回声区持续存在，但隆起高度和范围随时间延长而逐渐减小。B组凸向玻璃体的低回声隆起，其幅度下降很快，持续约3天，之后玻璃体腔不见强反光下隆起暗区。
　　5.F-ERG:三组在术后1周、4周、8周暗适应F-ERG的各波潜时、振幅分别与术前相比，行配对t检验，每组术后不同时间与术前的差异均无统计学意义（P均＞0.05）。
　　6.组织病理:术后4周，A组脉络膜上腔增宽，充满均质红染物质，脉络膜被推挤凸向玻璃体腔，少量炎细胞浸润，可见吞噬细胞围绕、吞噬CLHA;B组脉络膜视网膜组织结构完整，各层排列规则，无脉络膜脱离。术后8周，A组脉络膜依然增宽，填充均质红染物质，脉络膜组织可见色素紊乱和囊泡样改变。
　　结论：
　　1.本研究利用硅胶微导管经全层巩膜切口在兔眼脉络膜上腔注射交联透明质酸能够产生脉络膜内垫压效应。B型超声、F-ERG和组织病理检查证实脉络膜上腔内垫压效应有效，持久，安全。
　　2.CLHA是理想的脉络膜上腔内垫压移植物材料。
　　3.脉络膜上腔是脉络膜上腔内垫压移植物植入的理想空间。

目录

声明

摘要

缩略语

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

材料和方法

1 材料

1．1 实验动物

1．2 主要仪器设备

1．3 主要试剂

2 方法

2．1 动物分组

2．2 手术操作步骤

2．3 眼压测量

2．4 眼底照相

2．5 B型超声测量

2．6 暗适应闪光视网膜电图(F-ERG)测量

2．7 光学显微镜检查(Light microscope，LM)

3 统计学分析

结果

1 眼部情况

1．1 术中情况

1．2 术后情况

1．3 并发症

2 眼压

2．1 不同时间点实验眼与对侧对照眼的眼压比较

2．2 不同时间点三组间的眼压比较

3 B型超声检查结果

4 暗适应F-ERG检测视网膜功能

4．1 脉络膜上腔注射术后1周暗适应F-ERG

4．2 脉络膜上腔注射术后4周暗适应F-ERG

4．3 脉络膜上腔注射术后8周暗适应F-ERG

5 H-E染色切片观察

讨论

1 脉络膜上腔注射CLHA术后对眼压影响

2 F-ERG评估脉络膜上腔注射术后视功能

3 临床应用前景

3．1 视网膜脱离

3．2 近视性牵拉性黄斑病变

4 脉络膜上腔内垫压术潜在并发症

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

附录

综述 脉络膜上腔注射交联透明质酸的研究进展

致谢