脐带间充质干细胞注射液生产过程中部分单元的工艺优化

摘要

为了克服冷藏在4℃或冷冻在-20℃的脐带随保存时间的延长间充质干细胞（UC-MSCs）分离成功率逐渐下降，分离成功后的间充质干细胞数量减少、干性不足，造成采集成本、生产成本及检测成本浪费的问题，本论文对保存工艺进行了优化。将新鲜采集的脐带简单处理成脐带组织块，在冻存液中通过三步降温法，保存于液氮中（-196℃），待生产需要时复苏，组织块爬片法分离脐带间充质干细胞，成功率达到100％，且各项检验指标满足生产要求。液氮保存新鲜脐带的工艺，不仅使脐带的高废弃率减低为0，而且还解决了脐带采集不足时，脐带供应的问题。
　　为了筛选间充质干细胞注射液的生产配方，降低生产成本，通过对0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液、复方电解质注射液在不同时间点及环境温度下对UC-MSCs活率、贴壁能力和倍增时间的影响研究，发现复方电解质注射液作为细胞保存液，保存UC-MSCs的生物学活性优于其他2种输注液。同时为了降低生产成本及输注过程中的过敏反应发生率，对含不同质量分数人血白蛋白的复方电解质保存注射液中的UC-MSCs生物学活性进行了比较研究，发现1%的人血白蛋白即能明显提高细胞的生存率，在4℃条件下保存24小时后，细胞活力、表面特异性抗原、多向分化能力、免疫调节能力、生长增殖情况等检测指标完全满足FDA关于细胞移植时的活性的要求，且符合各项公司质量标准。从而在生产过程中节约了50%的人血白蛋白用量，且降低了人血白蛋白过敏反应的发生率。

目录

声明

第一章 文献综述

1.1 间充质干细胞种类

1.2 UC-MSCs制备工艺

1.3 选题背景和研究内容

第二章 间充质干细胞脐带保存工艺研究

2.1 实验材料及仪器

2.2 实验方法

2.3 检测方法

2.4 结 果

2.5 讨论

第三章 人脐带间充质干细胞注射液保存介质筛选

3.1 实验材料及仪器

3.2 实验方法

3.3 检测方法

3.4 结果

3.5 讨论

第四章 结论与展望

4.1 结论

4.2 展望

参考文献

致谢