原癌基因Lmo2不同剪切蛋白的定位及功能初探和CEBPβ在成骨细胞分化中的作用方式研究

摘要

Lmo2是隶属于LIM蛋白家族的一名成员,是一个在T淋巴细胞白血病中起重要作用的原癌基因.此蛋白不具有直接与DNA结合的能力而是通过作为桥梁分子形成蛋白复合体来调节下游靶基因的转录.对于小鼠Lmo2基因的研究表明Lmo2与小鼠胚胎卵黄囊期的红细胞生成密切相关,并且在小鼠的成体造血中发挥不可缺少的作用.Lmo2基因目前共有6种mRNA的剪切模式报导,其中5种编码相同的一个158个氨基酸的蛋白质,但是mRNA的5'端起始位点不同,而且不同的剪切模式由于表达量的不同可以形成不同的蛋白复合体而行使不同的功能,包括正常的造血功能和导致T细胞白血病;该实验室利用cDNA 5'末段克隆技术从成人肾组织mRNA中克隆到了Lmo2的另一种剪切模式,它编码一个N端序列不同但保留了特征性LIM结构域的蛋白质.

目录

第一部分原癌基因Lmo2不同剪切蛋白的定位及功能初探

前言

实验材料及设备

实验技术以及方法

(一)荧光定位试验

(二)RPA基本流程简述

(三)克隆新报道的Lmo2剪切模式的启动子区域以检验活性。

试验结果

讨论

小结

参考文献

第二部分CEBP β在成骨细胞分化中的作用方式研究

前言

本实验室在对于C/EBP的研究中同时进行两条实验路线：

本实验室对于CEBP的前期研究结果

实验材料及设备

实验技术以及方法

试验结果

质粒的构建

总蛋白的免疫共沉淀

讨论

小结

参考文献

致谢

附录