蛋白磷酸酶抑制剂(PP1-12)对心肌梗死大鼠心室重塑及心功能的影响

摘要

背景与目的：细胞凋亡在心肌梗死后心室重塑和心力衰竭中发挥着重要的作用。针对心肌细胞凋亡制定治疗策略，将有助于抑制心室重塑，改善心功能。内质网应激通路是细胞凋亡的重要途径，蛋白磷酸酶抑制剂PP1-12能够使关键调控因子eIF-2α处于持续磷酸化状态，在翻译水平抑制蛋白质的合成，减轻内质网负荷，抑制细胞凋亡。本实验将利用大鼠心肌梗死模型，评价PP1-12对心梗后心室重塑和心功能的影响，并探讨其作用机制。
　　 方法：结扎雄性SD大鼠冠状动脉前降支建立心肌梗死模型，24h内存活大鼠随机分为六组：①阴性对照组(生理盐水，NS组)；②溶剂对照组(Vehicle组)；⑧PP1-12低浓度组(1mg/kg/d，PP1-12-1组)；④中浓度组(3mg/kg/d，PP1-12-3组)；⑤高浓度组(10mg/kg/d，PP1-12-10组)；⑥阳性对照组(培哚普利2mg/kg/d，Perindopril组)。另设假手术组(Sham组)，即仅在心脏相同位置穿线而不结扎，其余操作均同手术组。术后24小时开始连续给药4周，超声心动图测量左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、射血分数(EF)以及短轴缩短率(FS)等参数；血流动力学测定左室收缩压(LNSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室压力最大上升和下降速率(±dp/dtmax)等。心脏取出后测量左心室质量指数(LVWI)；HE和Masson染色观察心肌病理形态学；TUNEL染色检测心肌细胞凋亡水平；免疫组织化学方法测定CHOP、Caspase-12、Bcl-2及Bax等蛋白的表达水平。
　　 结果：(1)与Sham组相比，心肌梗死28d后，NS和Vehicle组的LVEDD、LVESD、LVWI、胶原容积分数(CVF)以及LVEDP等显著升高，EF、FS、±dp/dtmax等显著下降，而药物干预组各项指标均有不同程度的改善，以PP1-12-10和培哚普利组改善最为显著。(2)与Sham组相比，心肌梗死28d后，非梗死区心肌细胞凋亡增加，药物干预组细胞凋亡均明显减少，PP1-12具有剂量依赖性，其中在10mg/kg/d时降低较培哚普利组显著(P<0.01)。(3)PP1-12与Perindopril组不同程度的降低了各模型组非梗死区的CHOP、Caspase-12以及Bax蛋白的表达水平，以PP1-12-10效果最为显著。药物干预后，抗凋亡蛋白Bcl-2的表达有不同程度的升高，PP1-12组虽未达到统计学意义，但Bax/Bcl-2比值明显增加。
　　 结论：(1)PP1-12可以明显抑制心肌梗死后心室重塑，改善心功能，其机制可能与减少胶原沉积，抑制内质网应激途径相关心肌细胞凋亡有关。(2)血管紧张素转换酶抑制剂培哚普利改善心功能的作用在一定程度上可能是通过抑制内质网应激途径相关细胞凋亡实现的。

目录

文摘

英文文摘

英汉缩略对照

第一章 引言

第一节 研究背景及现状

第二节 选题依据

1.2.1 内质网应激与未折叠蛋白反应

1.2.2 内质网应激与心肌梗死

1.2.3 药物靶点的选择

第三节 动物模型的选择

第二章 材料与方法

第一节 实验材料

2.1.1 实验动物

2.1.2 主要实验仪器

2.1.3 主要药物和试剂

2.1.4 需要配置的溶液

第二节 实验方法

2.2.1 模型建立

2.2.2 超声心动图检测

2.2.3 血流动力学检测

2.2.4 标本采集

2.2.5 病理形态学及凋亡检测

2.2.6 统计学分析

第三章 实验结果

第一节 动物模型评估

第二节 心脏形态学及功能学的改变

3.2.1 超声心动图检测心功能变化

3.2.2 各实验组大鼠体重(BW)及左心室质量指数(LVWI)的比较

3.2.3 血流动力学参数的改变

3.2.4 HE染色

3.2.5 Masson染色

第三节 TUNEL检测心肌细胞凋亡程度

第四节 免疫组织化学检测凋亡相关蛋白的表达变化

3.4.1 CHOP和caspase-12蛋白的表达变化

3.4.2 Bax和Bcl-2蛋白的表达变化

第四章 讨论

第一节 PP1-12对心肌梗死后心室重构和心功能的影响

第二节 PP1-12对心肌细胞凋亡的影响

第三节 PP1-12对凋亡相关因子的影响

4.3.1 PP1-12对CHOP和caspase-12蛋白表达的影响

4.3.2 PP1-12对Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

第五章 结论

参考文献

致谢

综述 内质网应激与心血管疾病研究概述

参考文献

个人简历