提高大熊猫（Ailuropoda melanoleuca）初生幼仔免疫力前期研究

摘要

该研究通过对不同大熊猫圈养单位的人工乳配方,以及黑熊,成都麻羊等动物初乳的初步分析,选定了大熊猫代用乳配方;检测了由大熊猫母亲育幼的大熊猫初生幼仔肠道菌群的建立及组成情况;应用生化的方法测定了大熊猫幼仔血清中γ-球蛋白含量;将收集到的健康成年大熊猫血清冻干,并进行了冻干血清微生物培养、动物口服等安全试验.为提高大熊猫初生幼仔免疫力的研究奠定了一定的基础.研究结果:1、通过对圣迭哥动物园、北京动物园以及成都大熊猫繁育研究基地的人工乳的配方,以及黑熊成都麻羊和大熊猫初乳中粗蛋白、粗脂肪、乳糖、矿物质元素的含量进行分析,通过比较检测结果,认为成都大熊猫繁育研究基地的人工乳配方比较适合大熊猫幼仔.此配方为:山羊初乳:熊猫奶粉(panda milk):去离子水=3:1:6(质量比)2、大熊猫幼仔肠道正常菌群与其它动物相比比较特殊,厌氧菌的检出率和含量相对较低.1-35R龄大熊猫幼仔肠道正常菌群中以大肠埃希氏菌、粪链球菌为主.这期间粪便中菌群组成为较单纯,基本没有什么变化,在25日龄时才检测到乳杆菌,但仅是微量.截止2月龄没有发现双歧杆菌,肠道菌群也基本没有变化.3、双缩脲法测定大熊猫初生幼仔血清中总蛋白量,电泳分析不同蛋白比例,发现γ-球蛋白含量极低,截止19周龄最高仅为1.9g/l,为成年大熊猫的22.62﹪,γ-球蛋白仅占血清总蛋白4.1﹪,而成年大熊猫此数据为12.09﹪;13 日龄死亡的一只幼仔γ-球蛋白含量仅为0.4g/l,为成年大熊猫的4.76﹪,γ-球蛋白占血清总蛋白1.5﹪,证明大熊猫初生幼仔免疫力低下.根据检测结果确定了计算大熊猫幼仔添加成年大熊猫血清量的公式:添加剂量=7.5ml/100g体重×幼仔体重×50﹪×6mg/ml÷50﹪÷8.4mg/ml.4、健康成年大熊猫的血清冻干处理后进行微生物培养、哺乳小鼠口服等安全试验,证明口服冻干后的血清不会造成试验动物腹泻或发育不良等负面影响.

目录

前言

1.初乳的生物学意义

2.初乳的成分及作用

2.1初乳的成分

2.2初乳的作用

2.3初乳中免疫球蛋白的功能及来源

2.4初乳中含有的其他保护和调节因子

3.新生幼仔吸收外源性免疫球蛋白的意义和机制

4.幼仔被动免疫失败的原因

5.配方奶及免疫添加剂的应用

5.1婴儿配方奶

5.2免疫添加剂的应用

6.大熊猫的概况

7.国内外概况

8.本研究的目的和意义

试验一大熊猫初生幼仔肠道正常菌群的检测

1.试验目的

2.材料方法

2.1供试动物

2.2标本采集

2.3培养基

2.4微生物培养及鉴定

3.结果

4讨论与分析

试验二大熊猫代用乳的选择

1.试验目的

2.材料和方法

2.1材料

2.2测定指标

2.3测定方法

2.4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析受试乳样蛋白差异

3结果

3.1乳样常量营养成分检测结果

3.2矿物元素含量

3.3各乳样蛋白差异

4.讨论

4.1几种供选代用乳配方的比较

4.2代用乳的选择

试验三代用初乳的配制

1.试验目的

2.检测大熊猫幼仔血清γ-球蛋白含量

2.1动物来源

2.2血液采集

2.3测定方法

2.4结果

2.5讨论

3.计算血清的口服剂量

4.监测幼仔血清γ-球蛋白变化

5.血清的预处理

5.1大熊猫血清冻干

5.2冻干血清的安全试验

5.3安全试验结果及分析

6.代用初乳的配制

7.讨论

总体讨论与结论

1.总体讨论

1.1大熊猫人工乳的配制

1.2大熊猫初生幼仔肠道正常菌群

1.3免疫添加剂的选择

2.结论

参考文献

英文文摘

致谢