野扇花组培快繁及扦插繁殖研究

摘要

本研究为探索野扇花(Sarcococca rusci.folia Stapf)组培快繁的有效途径，以野扇花当年生叶片、腋芽和成熟胚为外植体，对野扇花的组织培养及植株再生进行了系统研究，主要研究结果如下： 1.外植体最适宜的取材季节是春季，尤其是4月份，在这一时期取材，外植体启动率、成愈率、成活率和生长诱导值最高，污染率、褐变率最低。 2.在本实验所选碳源中，适宜野扇花外植体生长的碳源是葡萄糖，较适浓度为30g·L<'-1>。其次为蔗糖，白糖的效果相对较差。 3.本实验所选有机附加物中，对野扇花外植体生长有较好促进作用的是水解酪蛋白，较适浓度为450 mg·L<'-1>。水解乳蛋白的效果相对较差，但二者的效果无显著差异。 4.在本实验所选培养基中，野扇花外植体在MS培养基上能很好地生长，1/2 MS较好，在B5培养基上的生长效果次之，在SH培养基上的生长势较差。 5.腋芽丛生芽诱导培养：有利于野扇花腋芽启动诱导的培养基配方组合为：MS+6-BA 1.0+NAA 0.1+IBA 0-1+蔗糖30 g·L<'-1>+CH 450 mg·L<'-1>，诱导率达85.3％。 6.愈伤组织诱导：有利于野扇花叶片和胚愈伤组织诱导的培养基配方组合分别为：MS+6-BA 0.5+IBA 0.5+2,4-D 0.05+蔗糖30 g·L<'-1>+CH 450 mg·L<'-1>，诱导率达80.1％；MS+6-BA 1.0+2,4-D 0.1+蔗糖30 g·L<'-1>+CH 450 mg·L<'-1>。 7.增殖与分化培养：有利于野扇花腋芽增殖的培养基配方组合：MS+6-BA 1.0+NAA 0.1+IBA 0.1+蔗糖30 g·L<'-1>+CH 450 mg·L<'-1>，28 d后增殖系数为6.22；较有利于野扇花叶片和胚愈伤组织增殖的培养基配方分别为：MS+6-BA 2.0+NAA 0.5+2,4-D0.1+蔗糖30 g·L<'-1>+CH 450 mg·L<'-1>，MS+6-BA 1.0+NAA 1.0+2,4-D 0.1+蔗糖3 0g·L<'-1>+CH 450 mg·L<'-1>，增值率分别达77.4％、66.7％；有利于诱导野扇花叶片和胚愈伤组织分化的培养基配方组合分别为：MS+6-BA 1.0+NAA 0.5+蔗糖30 g·L<'-1>+CH 450mg·L<'-1>，分化率可达75％；MS+6-BA 1.0+NAA 0.1+蔗糖30 g·L<'-1>+CH 450 mg·L<'-1>。 8.生根培养：有利于诱导野扇花丛生芽生根的培养基配方组合为：1/2 MS+IBA 1.0+NAA 0.1+AC 1.5+蔗糖15 g·L<'-1>，生根率可达70.3％。 9.炼苗与移栽：珍珠岩、蛭石、河沙的配比为3：2：1时，移栽成活率最高，为70.0％。 10.扦插繁殖：激素NAA与IBA按25.O mg·L<'-1>进行组合，对野扇花插条进行浸泡40min的处理，插穗的生根时间最短、长出的根最多、根最长、生根率最高。

目录

声明

1前言

2文献综述

2.1野扇花生物学特征

2.2野扇花属植物的利用价值

2.2.1野扇花属植物的药理价值

2.2.2野扇花属植物的生态价值和观赏价值

2.3愈伤组织、营养条件、激素水平及胚培养研究现状

2.3.1愈伤组织研究现状

2.3.2营养条件研究现状

2.3.3激素研究现状

2.3.4胚培养研究现状

2.4组培设计方法

2.5野扇花属植物研究现状与不足

3研究目的与意义

4材料与方法

4.1实验材料

4.2研究方法

4.2.1材料预处理

4.2.2培养条件

4.2.3技术路线

4.3实验设计

4.3.1预备实验

4.3.2初代培养

4.3.3继代增值与分化培养

4.3.4生根培养

4.3.5炼苗与移栽

4.4统计指标

4.4.1无菌体系建立建立的统计指标

4.4.2腋芽的诱导

4.4.3愈伤组织的诱导

4.4.4不定芽及愈伤组织增值、分化

4.4.5生根培养

4.4.6炼苗与移栽状况

4.5扦插繁殖研究

4.6数据处理

5结果与分析

5.1试管无菌体系的建立

5.1.1不同取材时期野扇花外植体褐变和污染状况

5.1.2不同取材时期野扇花外植体成活率和愈伤组织启动状况

5.1.3不同取材时期野扇花外植体成愈率和生长诱导值状况

5.1.4基本培养基类型的选择

5.1.5不同碳源对野扇花愈伤组织生长和丛生芽诱导的影响

5.1.6不同有机附加物对野扇花愈伤组织生长和丛生芽诱导的影响

5.2初代培养

5.2.1不同激素配比对野扇花腋芽诱导的影响

5.2.2不同激素配比对野扇花叶片愈伤组织诱导的影响

5.2.3不同激素配比对野扇花成熟胚愈伤组织诱导的影响

5.3不同激素配比对腋芽增殖及愈伤组织增殖、分化的影响

5.3.1不定芽增值诱导

5.3.2愈伤组织的增值

5.3.3不同激素配比对叶片愈伤组织分化的影响

5.3.4不同激素配比对野扇花成熟胚愈伤组织分化的影响

5.4生根培养

5.5炼苗与移栽

5.6扦插实验结果与分析

5.6.1不同激素处理对野扇花插穗扦插生根的影响

5.6.2不同浸泡时间处理对野扇花插穗生根的影响

6结论与讨论

6.1外植体取材时期的选择

6.2碳源的选择

6.3有机附加物质的选择

6.4外源激素对野扇花外植体分化的影响

6.4.1对茎段腋芽分化的影响

6.4.2对叶片愈伤组织诱导的影响

6.4.3对愈伤组织分化的影响

6.4.4对成熟胚诱导的影响

6.4.5对生根的效应

6.5不同激素处理对野扇花插穗生根的影响

7本实验存在的问题和下一步工作的建议

参考文献

致谢

附图

攻读硕士学位期间发表的文章