郁金类药用植物的显微鉴定、细胞学及RAPD分子标记研究

摘要

郁金为多基源常用中药材，2005年版《中华人民共和国药典》收载有姜科Zingiberaceae姜黄属Curcuma Roxb．植物温郁金C．wenyujin Y．H．Chen et C．Ling、姜黄C． longaL．、广西莪术C．kwangsiensis S．G． Lee et C．F．Liang、蓬莪术C． phaeocaulis Valeton的干燥块根。但川郁金C．sichuanensis C．K． Hsich et H．Zhang和川黄姜C。chuanhuangjiangZ．Y．Zhu的干燥块根也可作郁金药用。 由于郁金类药用植物的来源复杂、分布广、栽培品种多、形态变异大、大部分种类带花果标本不易采到，并且植物名和药用名常相互混淆，导致郁金类植物资源的分类，药材鉴定，质量控制等一直都比较困难。 本文对郁金类药用植物资源进行显微鉴定分析、染色体数目分析、RAPD分子标记分析，探讨我国郁金类植物资源的鉴定、染色体数目和种间及其种内亲缘关系等，旨在为郁金类药用植物资源的品种鉴定，优质种质资源评价与筛选，中药材质量评价及GAP基地建设提供理论依据。主要研究结果如下： 1、对6种郁金类药用植物的须根、块根及叶片进行显微鉴定结果表明：6种植物在须根、块根及叶片的结构基本一致，但也有一定的差异。在须根中除了川黄姜外，其余5种植物均可见大量油细胞。在块根中有棕色块、油细胞和淀粉粒存在，而且淀粉粒的形状、密度不一。6种材料块根内淀粉粒的差异比较大，根据淀粉粒的横切面形状可以更好的把它们鉴别开来。叶片中广西莪术上下表皮都分布有表皮毛，温郁金、蓬莪术和川黄姜只具有下表皮毛，姜黄、川郁金没有发现表皮毛。 2、对5种郁金类药用植物进行根尖染色体压片观察。结果表明：姜黄、川郁金、蓬莪术、温郁金和川黄姜的染色体均为2n=3X=63，且川郁金、川黄姜和蓬莪术的为首次报道，染色体基数均为X＝21。染色体属微小型染色体，很难进行核型分析。 3、采用RAPD（随机扩增多态性）分子标记技术对郁金类药用植物的33份材料进行了分析，并用NTSYSpc2．1软件对谱带作聚类分析，探讨了他们之间的亲缘关系。研究结果表明：6种郁金类药用植物的遗传相似系数变化比较大，从聚类图中可看出，同种植物不同材料间亲缘关系的远近与地理来源关系不大。 综上所述，6种郁金类药用植物的根、块根和叶的基本结构一致，大致可根据叶片有无表皮毛和块根中淀粉粒的形状将6种植物区分开来。姜黄、川郁金、蓬莪术、温郁金和川黄姜的染色体均为2n=3X=63。RAPD分子标记可以将姜黄属的6个种区分开，姜黄和川郁金的亲缘关系比较近，温郁金和川黄姜的也比较近。对亲缘关系的分析可为郁金品种的鉴定提供一定的理论依据。对染色体数目的了解可为郁金类药用植物的遗传育种提供理论基础。

目录

文摘

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声明

前言

一、文献综述

1.本草沿革及品种考证

2.郁会、莪术和姜黄原植物之间的相互关系

3.郁金、莪术和姜黄的药用价值及其利用

3.1 郁金

3.2 莪术

3.3 姜黄

4.郁金类药用植物的药源调查

4.1 在四川的资源状况

4.2 在广西的资源状况

4.3 在浙江的资源状况

4.4 在广东的资源状况

4.5 在云南的资源状况

5 郁金类植物种质资源的研究概况

5.1 郁金类植物中活性成分的研究

5.2 姜黄属植物细胞学、形态学方面的研究

5.3 姜黄属植物在分子生物学水平上的研究

5.4 姜黄属植物在栽培方面的研究

5.5 姜黄属植物在其它方面的研究

二、姜黄属六种药用植物的显微观察

1 材料与方法

1.1 供试材料

1.2 仪器与试剂

1.3 实验方法

2 结果与分析

2.1 叶片结构特征

2.2 须根结构特征

2.3 块根结构特征

2.4 检索表

3 讨论

三、五种郁金类药用植物的染色体数目分析

1.材料和方法

1.1 实验材料

1.2 实验方法

2.观察结果

3.讨论

3.1 染色体基数和倍性

3.2 关于染色体制片的取材、预处理和解离

附图

四、郁金类药用植物的RAPD聚类分析

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1.1 供试材料

1.2 研究方法

2.结果与分析

2.1 RAPD标记的多态性

2.2 遗传相似系数及聚类分析

3 讨论

3.1 RAPD标记揭示的郁金类药用植物种质资源间的遗传关系

3.2 RAPD技术在姜黄属植物分类研究中的可行性

参考文献

致谢