哈茨木霉(Trichoderma harzianum)菌株Th-30生防特性评价

摘要

在田间用哈茨木霉（Trichoderma harzianum）Th-30生防制剂处理土壤或植株，通过对蔬菜不同生育期的农艺性状、经济性状、产量和病害发展情况的考察，研究木霉的促生作用及生物防治效果。结果表明，哈茨木霉菌株Th-30对辣椒的促生、增产作用明显，对辣椒植株的促生率为17．1％，增产15．68％，且对辣椒疫霉（Phytophthora capsici）和尖镰孢（Fusarium oxysporum）引起的根腐病具有一定的防治作用。哈茨木霉菌株Th-30能提高黄瓜的地上部生物学产量，明显增大黄瓜藤蔓的节间距，有效增加黄瓜的坐果率，对黄瓜枯萎病和黄瓜白粉病也有很好的生物防治效果。试验表明，哈茨木霉菌株Th-30对白菜、芹菜、番茄幼苗均有显著的促生作用，能增加植株的株高、地茎、叶片数，提高蔬菜的品质和产量并能有效控制芹菜病毒病的发展，且对供试植株安全。 用还原糖法测定木霉菌株Th-30的几丁质酶活性，采用单因素和正交试验设计，研究了碳源、氮源、温度、pH值等发酵条件对哈茨木霉菌株Th-30生产几丁质酶的影响，并初步探讨木霉几丁质酶粗提液对番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea）的拮抗作用作。结果表明，哈茨木霉菌株Th-30以7．0g/L几丁质、2．0g/L蛋白胨、营养盐溶液50mL/L、微量元素1．0mL/L为培养基，在起始pH5．5、温度28℃、装瓶量50mL/250mL、接种量8％、诱导96h获得的几丁质酶活性最高。哈茨木霉菌株Th-30几丁质酶粗提液对番茄灰霉病菌有明显的拮抗作用，对番茄灰霉病菌生长的抑制率为67．61％～71．31％，对灰霉病菌孢子产生及萌发的抑制率分别为80．95％、81．43％，对病菌孢子致病性的抑制率为65．22％～70．51％。 采用紫外线诱变与药剂驯化相结合的方法，以哈茨木霉菌株Th-30为出发菌株诱导得到4株能在含常用杀菌剂福美双（Thiram）2×105μg/L的培养基上正常生长的耐药性变异菌株。毒力测定表明，福美双对几株变异菌株的ECso均相对于亲本菌株（EC50为0．21×105μg/L）提高了近2×105μg/L。筛选出一株优秀的变异菌株UV-4，在高浓度农药环境下正常生长并产生具有生防功能的几丁质酶，其耐药性几丁质酶（福美双含量为1×105μg/L）对黄瓜炭疽病菌（Colletotrichum lagenarium）孢子繁殖能力的抑制率为85．43％，对黄瓜炭疽病菌孢子致病力的抑制率为68．88％，并对病原菌菌丝的细胞壁具有降解作用。试验表明人工诱导获得的突变木霉菌株UV-4的抗药性及对病原菌拮抗活性都得到改良，且具有遗传稳定性，与靶标农药混用能达到协同防治蔬菜上的真菌病害的目的。

目录

文摘

英文文摘

声明

1 前言

1.1 木霉菌的特征及生防机制

1.1.1 木霉菌的特征

1.1.2 木霉菌的生防机制

1.2 木霉菌在生防上的应用

1.3 抗药性木霉研究

1.4 真菌几丁质酶研究进展

1.4.1 真菌几丁质酶的特性

1.4.2 真菌几丁质酶对植物病原真菌的作用机制

1.4.3 真菌几丁质酶在植物真菌病害防治中的作用

1.5 研究的目的和意义

2 材料与方法

2.1 材料与仪器

2.1.1 材料

2.1.2 仪器与试剂

2.2 木霉菌株Th-30促生及生防效果评价

2.2.1 木霉菌对几种蔬菜的促生作用

2.2.2 木霉菌株Th-30对蔬菜的生防效果评价

2.3 木霉菌株Th-30几丁质酶生产条件及对灰霉病菌的拮抗作用

2.3.1 木霉菌几丁质酶的诱导

2.3.2 几丁质酶粗提液的制备

2.3.3 木霉菌株Th-30几丁质酶活力测定

2.3.4 木霉菌株Th-30产几丁质酶条件优化

2.3.5 几丁质酶粗提液对番茄灰霉病菌的作用

2.4 耐福美双哈茨木霉菌株诱导及其几丁质酶生防特性研究

2.4.1 抗药性木霉菌株紫外诱变

2.4.2 重复诱导及药剂驯化

2.4.3 毒力及遗传稳定性测定

2.4.4 抗性突变体产孢能力及生长速率的测定

2.4.5 突变菌株几丁质酶的初步研究

3 结果与分析

3.1 木霉菌株Th-30生防制剂对几种蔬菜的促生作用研究

3.1.1 不同处理的黄瓜农艺性状比较

3.1.2 哈茨木霉菌株Th-30对番茄幼苗的促生作用

3.1.3 哈茨木霉菌株Th-30对芹菜植株生长的影响

3.1.4 哈茨木霉菌株Th-30对辣椒植株生长的影响

3.2 木霉制剂对几种蔬菜病害生防效果评价

3.2.1 哈茨木霉菌株Th-30对黄瓜枯萎病的防治效果

3.2.2 哈茨木霉菌株Th-30对黄瓜白粉病的防治效果

3.2.3 哈茨木霉菌株Th-30对芹菜病毒病的控制作用

3.2.4 哈茨木霉菌株Th-30对辣椒根腐病的防治效果

3.3 木霉菌几丁质酶生产条件及对灰霉病菌的拮抗作用

3.3.1 木霉菌几丁质酶生产条件研究

3.3.2 几丁质酶粗提液对番茄灰霉病菌的作用

3.4 耐药性哈茨木霉菌株的诱导及其几丁质酶生防特性研究

3.4.1 耐药性木霉菌株的诱导及突变菌株抗药性的遗传稳定性

3.4.2 变异木霉菌株生长速率和产孢能力测定

3.4.3 耐药木霉菌株几丁质酶的研究

4 结论讨论

4.1 木霉对蔬菜的防病促生作用

4.2 木霉几丁质酶发酵条件的研究

4.3 耐药性木霉诱导及其几丁质酶生防特性的研究

参考文献

致谢

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