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濒危植物延龄草(Trillium tschonoskii)的遗传多样性研究

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第一章延龄草居群遗传多样性的ISSR分析

摘要

引言

1材料与方法

1.1实验材料

1.2试验方法

2结果与分析

2.1 DNA提取方法比较

2.2 ISSR遗传多样性分析

2.3居群遗传结构分析

2.4延龄草居群间的遗传距离和聚类分析

2.5 Mantel相关性检测

3讨论

3.1延龄草DNA提取

3.2 ISSR实验的稳定性

3.3延龄草的遗传多样性

3.4延龄草居群的遗传结构

3.5延龄草遗传多样性的保护策略

参考文献

第二章延龄草居群遗传多样性的AFLP分析

摘要

引言

1材料与方法

1.1实验材料

1.2试验方法

2结果与分析

2.1 AFLP实验条件优化

2.2 AFLP遗传多样性分析

2.3居群遗传结构的分析

2.4延龄草居群间的遗传距离和聚类分析

3讨论

3.1 AFLP实验条件的优化

3.2延龄草的遗传多样性

3.3延龄草居群的遗传结构

3.4 ISSR与AFLP标记的比较

参考文献

第三章延龄草离体培养体系的初步建立

摘要

引言

1材料与方法

1.1供试材料

1.2技术路线

1.3试验方法

2结果与分析

2.1启动培养

2.2继代培养

2.3生根培养

3讨论

3.1延龄草的离体培养

3.2延龄草离体培养中存在的问题

参考文献

第四章土壤环境条件对延龄草根茎中薯蓣皂甙元含量的影响

摘要

引言

1材料与仪器

1.1实验材料

1.2仪器与试剂

2试验方法

2.1薯蓣皂甙元的提取

2.2薯蓣皂甙元的定性鉴定

2.3溶液配制

2.4薯蓣皂甙元色谱峰纯度的鉴定

2.5薯蓣皂甙元含量的测定

2.6土壤分析

3结果与分析

3.1薯蓣皂甙元的定性鉴定

3.2薯蓣皂甙元色谱峰纯度的鉴定

3.3薯蓣皂甙元标准曲线、进样精密度、溶液稳定性、重复性及回收率试验

3.4不同地区延龄草样品薯蓣皂甙元的含量

3.5影响延龄草薯蓣皂甙元含量的土壤因素

4讨论

4.1延龄草薯蓣皂甙元的提取及测定

4.2延龄草薯蓣皂甙元含量与土壤养分元素之间的关系

参考文献

结论

1遗传多样性研究

1.1遗传多样性研究的理论和实际意义

1.2遗传多样性与遗传结构

1.3影响物种遗传变异和遗传结构的因素

2遗传多样性保护

2.1保护遗传学研究概况

2.2保护遗传学在濒危植物研究中的应用

2.3遗传多样性研究方法及其进展

3药用植物组织培养研究进展

3.1药用植物组织培养研究现状及进展

3.2药用植物组织培养存在的问题

4延龄草植物的研究

4.1形态特征及地理分布

4.2研究现状及进展

参考文献

致谢

在读期间发表及待发表的论文情况及获奖情况

声明

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摘要

延龄草(Trilliumtschonoskii),俗称为“头顶一颗珠”,为百合科延龄草属的多年生草本植物,主要分布在东亚及北美。在中国,主要分布在四川西南部海拔1500到3000米的地方,云南西北、浙江西北、福建北部及甘肃东南部等地区也有分布。其根茎含薯蓣皂甙、叶片含黄酮类化合物等有效成份,具杀菌、止血、解毒等功效,主治头晕目眩、高血压、神经衰弱症,是传统名贵中药之一。延龄草具有典型“北极第三纪地理植物区系”植物的特征,在植物系统与进化研究中占有重要地位。近年来由于森林砍伐过度,人为活动加剧,破坏了林下生长环境,使其分布范围日趋缩小,加上根茎入药,挖掘过量和种子休眠期长、发芽率低等生物学特性,致使种群数量逐渐减少,已被国家列为三级保护植物。因此很有必要进行延龄草保护遗传学研究,探讨它的濒危机制。在濒危物种中保护遗传学的首要目标是评价遗传多样性水平和分布。  有关延龄草遗传多样性的研究,先前的工作主要集中在细胞学方面。本研究从DNA水平上,采用ISSR和AFLP两种分子标记,对延龄草居群的遗传多样性和遗传结构进行了分析,目的在于了解延龄草居群的遗传学状况,分析其濒危的机制,为其保护措施的制定提供科学的理论根据。为了挽救延龄草资源,还进行了离体培养的探讨。对不同产地延龄草的薯蓣皂甙元含量及相关的土壤因子进行了分析。

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