富血小板血浆促进骨组织修复的实验研究

摘要

本研究通过对富血小板血浆(Platelet-richplasma,PRP)制备方法的改进，制备获得含有高浓度血小板的富血小板血浆，并检测其中的TGF-β1等生长因子浓度；体外原代培养人成骨细胞并传代，从细胞水平探讨富血小板血浆对人成骨细胞增殖的影响；建立兔颅骨实验性骨缺损，动物实验骨形成水平探讨其促进骨组织修复的能力；为PRP临床应用于口腔颌面部骨缺损修复提供更多资料。 方法：本研究分为3个部分。1.对PRP传统制备方法进行改进，分别用传统法和改良法制备得到PRP，通过血常规分析、ELISA法测定TGF-β1浓度和无菌试验，比较两方法制备PRP的有效性和稳定性 2.原代培养人成骨细胞并传代，将其与PRP来源的人血清共同培养，以PPP来源的人血清和不含任何血清的细胞培养基作为对照，通过MTT比色法检测人成骨细胞的增殖情况，探讨其对体外培养人成骨细胞增殖的影响。 3.建立兔颅骨骨缺损，将动物自体来源的PRP与HA/TCP材料复合，联合可吸收胶原膜GBR技术修复兔颅骨骨缺损，通过X线检查、组织学切片观察和Ⅰ型胶原免疫组化染色观察术后2、4、8周时的骨缺损修复情况。 结果：1.通过对PRP传统制备方法的改进，可稳定获得含有高浓度血小板和生长因子的PRP，经无菌试验证实其微生物安全性； 2.PRP来源的人血清具有促进体外培养人成骨细胞增殖的作用； 3.动物自体来源的PRP与HA/TCP复合可提高骨移植材料的骨诱导活性，促进骨修复早期的成骨活动，有利于骨缺损的早期愈合；PRP复合材料与胶原膜GBR技术联合应用可获得最佳的骨缺损修复效果。

目录

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前 言

第一部份：对PRP的制备方法的改良及PRP性能测定

实验一 传统二次离心法的改良法制备PRP和PPP

实验二 改良法和传统法制备PRP的比较Ⅰ:活性指标的比较

实验三 改良法和传统法制备PRP稳定性的比较

实验四 改良法和传统法制备PRP细菌污染的比较

讨论

总结

参考文献

第二部份:对PRP的制备方法的改良及PRP性测定

实验一 原代人髂骨松质骨细胞培养

实验二 人成骨细胞在PRP来源SRGF作用下增殖特性

讨论

小结

参考文献

第三部份:富血小板血浆在兔颅骨骨缺损修复中的作用的动物实验研究

前言

实验一 兔颅骨骨缺损模型的建立

实验二 应用PRP复合材料修复兔顶骨临界骨缺损的成骨效果组织学研究

目的

材料和方法

结果1

结果2

实验三 应用PRP复合材料修复兔顶临界缺损缺损

讨论

结论

参考文献

综 述:富血小板血浆在口腔颌面部骨缺损修复中的应用