人甲状旁腺激素1-34对牙本质形成和矿化影响的实验研究

摘要

甲状旁腺激素(Parathyroidhormone，PTH)是一种调节血钙并使其维持在正常水平的重要激素类物质，PTH1-34是其主要降解产物，具有PTH的全部生物学活性。研究表明：PTH可以影响成牙本质细胞的前体细胞(牙乳头间充质细胞和/或牙髓细胞)的分化和功能，在一定程度上影响牙本质形成和矿化，但是其影响是通过直接作用于成牙本质细胞分化、牙本质基质形成和矿化，还是通过调节血浆钙磷浓度间接影响牙齿发育，还有待于研究。本研究在以往研究的基础上，从动物和细胞水平进一步探讨PTH影响牙本质形成和矿化的机制。 目的观察hPTH1-34(humanParathyroidhormone1-34)对牙本质的形成和矿化的影响；以及观察hPTH1-34对PTH/PTHrP受体(Parathyroidhormone/ParathyroidhormonerelatedproteinReceptor)mRNA在人牙髓细胞中的表达的影响，探讨PTH影响牙本质形成和矿化的机制。方法1.切除大鼠甲状旁腺后，建立牙本质发育不全的动物模型，再人工给予不同剂量的hPTH1-34，检测血钙水平的变化，6周后处死大鼠，取下颌切牙制作切片，HE染色，光镜观察并进行图像分析；2.选用培养的第四代牙髓细胞分为两组，实验组培养基加入hPTH1-34，调整终浓度为33.3nmol/L，在其培养的第5，10，15，20天提取总RNA，以RNA为模板在逆转录酶作用下合成cDNA，加入特异引物进行PCR扩增，同时扩增β-肌动蛋白的cDNA作为半定量RT-PCR的内参照，对PCR产物进行半定量分析。结果1.切除了甲状旁腺的大鼠血钙水平下降，牙本质矿化缺陷，在给予hPTH1-34皮下注射后可以检测到血钙水平上调，光镜观察和图像分析结果发现牙本质的形成和矿化发生逆转，10nmol/kg组和20mmol/kg组作用效果优于5nmol/kg组(P＜0.05)。2.在人牙髓细胞培养的5d，10d，对照组和实验组的PTH/PTHrP受体mRNA水平均较低，10d以后PTH/PTHrP受体mRNA水平开始升高，实验组高于对照组，差异有统计学意义。结论1.PTH可以影响牙本质的形成和矿化。2.PTH/PTHrP受体的表达与牙髓细胞的分化密切相关；hPTH1-34可以促进PTH/PTHrP受体的表达，PTH可能通过促进PTH/PTHrP受体的表达或与PTH/PTHrP受体结合影响牙本质的形成和和矿化。

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英文缩略词表

前 言

实验一人甲状旁腺激素1-34（hPTH1-34）对大鼠牙本质形成和矿化的影响

1材料和方法

2结果

3讨论

实验二人甲状旁腺激素1-34（hPTH1-341）对PTH/PTHrP受体mRNA在人牙髓细胞培养中的表达的影响

1材料和方法

2结果

3讨论

4小结

全文总结

参考文献

文献综述甲状旁腺切除术对牙齿发育矿化和骨代谢的影响

个人简历

致 谢