人尿中尼古丁及其代谢产物可的宁的测定方法研究

摘要

目的：采用固相萃取进行样品前处理，建立同时测定人尿样品中尼古丁及其代谢产物可的宁的火焰离子化检测．气相色谱法和气相色谱-质谱联用法。在实验室质量控制基础上，采用固相萃取-火焰离子化检测器．气相色谱法对607份人尿样本进行了测定，并用气相色谱-质谱联用法对测定结果进行了验证。本研究为我国烟草控制的流行病学调查和吸烟行为干预提供可靠的检测手段和实验数据。 方法：对尿液中尼古丁及其代谢产物可的宁测定的前处理和色谱条件进行了优化，分别建立了两种检测方法： 1．按基线调查资料将尿样分成非吸烟、被动吸烟和吸烟三组。采用C<,18>固相萃取小柱富集、净化尿液中的尼古丁和可的宁，磷酸盐缓冲液(pH=7.5)调节pH值后上柱，用O.4％氨水溶液(v／v)淋洗杂质，甲醇-4％醋酸(90:10,v／v)洗脱待测物，氮气吹干定容后，用气相色谱-火焰离子化检测器测定，根据保留时间定性，标准曲线法定量。 2．同一尿样经处理后，在优化的色谱条件下，利用气相色谱-质谱联用法同时测定尼古丁及其代谢产物可的宁，与气相色谱法(火焰离子化检测器)的测定结果进行比较。 结果：1．优化了固相萃取条件和气相色谱测定条件，建立了同时测定尿样中尼古丁、可的宁的火焰离子化检测-气相色谱法，尼古丁和可的宁的线性范围分别为0.10μg/ml～100μg／ml和O.20μg/ml～200μg/ml，本方法的最低检出浓度为尼古丁0.6ng/ml尿和可的宁1.2ng/ml尿。尼古丁和可的宁测定的相对标准偏差(RSD)分别为2.50％～4.70％和4.20％～5.10％，加标回收率分别为80.00％～88.00％和78.85％～103.8％。 2．在同样的前处理方法下，利用气相色谱．质谱联用法测定尿液中的尼古丁及其代谢产物可的宁。尼古丁和可的宁的线性范围分别为4.0ng/ml～40ug/ml和20.0ng/ml～80ug/ml，方法的最低检出浓度为尼古丁0.02ng/ml尿和可的宁0.14ng/ml尿。测定的相对标准偏差(RSD)为0.42％～2.80％和0.80％～2.71％，加标回收率分别为74.83％～95.56％和83.33％～94.44％。经统计分析，两种方法的测定结果无显著性差异(t=-1.591，P=0.115和t=1.845，P=0.068)。 结论：本研究建立了同时检测人尿中的尼古丁及其代谢产物可的宁的固相萃取-火焰离子化检测．气相色谱法，具有快速、简便、分析成本低等优点，用于大量样品的检测，取得了满意的结果。所建立的固相萃取-气相色谱-质谱联用法具有检出限低，分析时间短，定性、定量准确等优点。两种方法测定结果具有可比性。 经文献检索，本研究所建立的方法并应用于大量样本的测定在国内尚未见报道。在问卷调查的基础上，用本方法对大量人尿样品进行了检测，研究结果可为进一步探讨生物材料中尼古丁及其代谢产物检测方法及流行病学调查和吸烟相关行为干预研究提供可靠的检测手段和实验数据，对我国实行烟草控制，减少环境污染，保护非吸烟和被动吸烟人群的健康具有重要意义。

目录

声明

摘要

前言

第一部分固相萃取－气相色谱法测定人尿中尼古丁及其代谢产物可的宁1.前言

第一部分固相萃取－气相色谱法测定人尿中尼古丁及其代谢产物可的宁2.实验部分

第一部分固相萃取－气相色谱法测定人尿中尼古丁及其代谢产物可的宁3.结果与讨论

第一部分固相萃取－气相色谱法测定人尿中尼古丁及其代谢产物可的宁4.结论

第一部分固相萃取－气相色谱法测定人尿中尼古丁及其代谢产物可的宁参考文献

第二部分固相萃取－气相色谱－质谱联用法测定尿液中尼古丁和可的宁1.前言

第二部分固相萃取－气相色谱－质谱联用法测定尿液中尼古丁和可的宁2.实验部分

第二部分固相萃取－气相色谱－质谱联用法测定尿液中尼古丁和可的宁3.结果与讨论

第二部分固相萃取－气相色谱－质谱联用法测定尿液中尼古丁和可的宁4.结论

第二部分固相萃取－气相色谱－质谱联用法测定尿液中尼古丁和可的宁参考文献

综述：尼古丁及其代谢产物可的宁研究现状

致谢