多西环素对四种大鼠实验性肺动脉高压模型的影响

摘要

目的:建立四种大鼠实验性肺动脉高压模型，即低氧模型、野百合碱模型、高肺血流模型以及新生内膜模型，观察广谱基质金属蛋白酶(MMPs)抑制剂多西环素对这几种模型肺动脉高压肺血管重构的影响，从而探讨MMPs在肺动脉高压肺血管重构中的作用，并了解这种作用在不同病理生理条件所致的肺血管重构中是否具有普遍意义。 方法:将成年健康雄性SD大鼠(350-400g)，随机分为正常组(N)、低氧模型组(H)及其干预组(HD)、野百合碱模型组(M)及其干预组(MD)、高肺血流模型组(P)及其干预组(PD)、新生内膜模型组(PM)及其干预组(PMD)。高肺血流模型通过左肺切除建立，新生内膜模型通过左肺切除加野百合碱注射建立。干预药物多西环素(20mg/kg．d．灌胃)均于模型建立2天前开始给予直至实验终止。4周后(新生内膜模型为5周)观察各组的平均肺动脉压(mPAP)、右心指数即“右心室/左心室+室间膈”重量比；光镜观察肺小动脉中膜厚度百分比、、肺非肌性小动脉肌化程度、血管外膜胶原沉积以及新生内膜产生情况；观察肺小血管管壁细胞增殖度和凋亡蛋白Caspase-3表达变化；免疫组化和实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测MMP-2，9以及组织抑制因子-1(TIMP-1)在肺组织中的表达情况；明胶酶谱法检测肺组织匀浆中明胶酶活性的变化情况。 结果:①mPAP和右心指数，各模型组(H，M，P，PM)均高于正常组(N)和其相应的干预组(HD，MD，PD，PMD)，(P<0.01)。②肺小动脉管壁厚度百分比、肺非肌性小动脉肌化程度、肺小血管管壁细胞增殖度和血管外膜胶原沉积4项指标，各模型组均高于正常组和其相应的干预组，(P<0.01)。③Caspase-3阳性表达各模型组均低于其相应的干预组，(P<0.01)。④除PM和PMD组外，其他组均未见新生内膜形成。新生内膜增殖度PM组高于PMD组，(P<0.01)。⑤免疫组化和RT-PCR对MMP-2，9在肺组织中的表达定量显示各模型组均高于正常组(N)和其相应的干预组，(P<0.01)。肺组织匀浆中明胶酶活性，各模型组均高于正常组(N)和其相应的干预组(P<0.01)。⑥免疫组化和RT-PCR对TIMP-1在肺组织中的表达定量显示其变化趋势与MMPs在肺组织的表达变化趋势一致，差异有统计学意义，(P<0.01)。 结论:广谱MMPs抑制剂多西环素能减轻4种模型的肺动脉高压和肺血管重构，提示MMPs高表达可能在肺动脉高压肺血管重构的形成过程中发挥重要作用。在4种不同病理生理条件下得到的结论一致，提示这种作用可能具有普遍意义。多西环素干预肺动脉高压的机制可能与通过抑制MMPs活性，从而抑制平滑肌细胞(SMCs)的增殖和迁移，诱导细胞凋亡有关。本研究的结果支持应用MMPs抑制剂作为未来肺动脉高压的干预治疗的一个新策略。

目录

声明

摘要

前言

实验材料与方法

结果

讨论

小结

附图

参考文献

综述　基质金属蛋白酶与肺动脉高压肺血管重构

致谢