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【6h】

剪切力对血管内皮细胞表达细胞因子及血管活性因子的影响

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目录

摘要

序言

第一部分:脐静脉内皮细胞的培养和平行平板流动小室的建立

第二部分:剪切力对血管内皮细胞表达细胞因子及血管活性因子的影响

试验一:剪切力对脐静脉内皮细胞表达IL-8的影响

实验二:剪切力对脐静脉内皮细胞表达内皮素和一氧化氮的影响

实验三:剪切力对脐静脉内皮细胞内游离钙的影响

结语

参考文献

综述 剪切力对血管内皮细胞功能的影响

致谢

附录

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摘要

该实验以体外培养的人脐静脉内皮细胞为研究对象,借助经改进的平行平板流动小室为脐静脉内皮细胞施加流动剪切力,利用放免方法、硝酸还原酶法及荧光染色法来检测脐静脉内皮细胞在不同大小和不同时间剪切力作用下表达IL-8、ET-1、NO及胞内游离钙离子的规律,对于进一步探究内皮细胞通过何种信号传导途径将剪切力信号和刺激传入内皮细胞内并引起一系列的细胞应答和认识流动剪切力作用对血管内皮细胞功能、代谢等产生的影响具有重要意义,有利于对某些疾病的早期诊断和治疗.把培养的脐静脉内皮细胞传代3至5代后用于实验.利用流动小室装置,通过精密蠕动泵灌注液体来提供剪切力,选择5dyne/cm<'2>、10dyne/cm<'2>、15 dyne/cm<'2>三种剪切力,施加于培养的脐静脉内皮细胞,作用不同时间后检测内皮细胞表达IL-8、ET-1、NO和细胞内游离钙的变化.平行平板流动小室是常用的一种细胞加载装置,该研究使用蠕动泵来控制循环流量,调节剪切力的大小,容易控制流量和时间.但该技术循环液是均匀流动,与体内脉动血流形式有一定差别,只局限于模拟血流均匀的血管处,无法模拟血管分又及弯曲处的流体流动.

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