大鼠耳蜗大上皮嵴的形态学演变及p27的表达*

摘要

再生可能是重复正常发育中的毛细胞分化过程.这样,理解毛细胞的分化机理,就有助于促进毛细胞的再生.毛细胞的分化过程受一定数量的特定基因的调控.p27<'Kip1>,一种细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(cyclin-dependent kinase inhibitor,CDKI),在调节Corti氏器细胞增殖方面起重要作用.胚胎发育过程中,表达p27<'Kip1>的细胞斑停止分裂,退出细胞周期,形成前感觉斑,建立了确定数量的前感觉细胞,毛细胞从中得以分化.该课题对不同时期的大鼠耳蜗大上皮嵴中p27<'Kip1>表达情况进行观察,探讨p27<'Kip1>在毛细胞分化和再生过程中的作用.一、大鼠耳蜗大上皮嵴的形态学演变选取胚胎期14天、16天、18天、20天和出生后当天、2天、5天、7天、10天、14天等10个年龄段的大鼠耳蜗(记作E14、E16、E18、E20、P0、P2、P5、P7、P10、P14),经过固定、脱水、包埋等处理后,进行冰冻切片和HE染色.分别比较同一年龄段耳蜗的顶、中、底回蜗管和不同年龄段耳蜗的同回蜗管,从而观察胚胎期和新生期大鼠耳蜗大上皮嵴形态上的变化.二、p27<'Kip1>在不同时期的大鼠耳蜗大上皮嵴上的表达以1:100抗p27<'Kip1>小鼠单克隆抗体为一抗,1:200异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)标记山羊抗小鼠IgG为二抗,采用间接法,对E12、E13、E14、E16、E18、E20、P0、P2、P5、P7、P10、P14等12个年龄段的大鼠耳蜗进行免疫荧光组织化学检查,观察p27<'Kip1>在大上皮嵴中的表达情况.抗p27<'Kip1>阳性细胞其胞核呈黄绿色荧光.

目录

英文缩略语

前 言

第一部分大鼠耳蜗大上皮嵴的形态学演变

材料和方法

结 果

讨 论

第二部分p27Kip1在不同时期大鼠耳蜗大上皮嵴上的表达

材料与方法

结 果

讨 论

结论

参考文献

文献综述 大上皮嵴与哺乳类耳蜗毛细胞的分化和再生

致 谢

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