BMP2转染骨髓间充质干细胞修复羊股骨头坏死

摘要

研究目的:评价Adv-hBMP-2基因转染的BMSCs与TCP(磷酸三钙)复合的组织工程化骨对羊股骨头无菌性坏死的修复效果.材料与方法:1.扫描电镜观察TCP(磷酸三钙)与羊骨髓间充质干细胞的复合情况:抽取羊骨髓行BMSCs培养,取第2代BMSCs4皿与TCP材料复合,然后行扫描电镜观察.2.ELISA定量检测细胞培养上清中BMP-2浓度:抽取羊骨髓行BMSCs培养,分为3组:Ⅰ Adv-hBMP-2转染细胞组;Ⅱ Adv-βgal转染细胞组;Ⅲ未转染细胞组.分别在第1,4,7和10天定量检测细胞培养上清中BMP-2浓度.3.建立股骨头无菌性坏死动物模型:结扎羊的双侧旋股内、外侧动脉,然后钻孔将液氮灌入股骨头.术后3周行大体形态、X线和组织学检查.评价骨头坏死情况.4.分组与治疗:未治疗组3只共6侧,BMP-2治疗组14侧(右侧)和β-gal治疗组14侧(左侧).造模手术后3周植入或不植入细胞与TCP的复合物,手术后的不同时间进行大体形态、X线、组织学检查(脱钙切片和四环素荧光标记)和生物力学测定.5.ELISA定量检测组织工程化人工骨内BMP-2浓度:9只羊分为2组:Ⅰ BMP-2治疗组(右侧);Ⅱ βgal治疗组(左侧).先建立股骨头坏死动物模型,在3周后植入BMP-2基因修饰的组织工程化人工骨,在植入后的第1,2和第3周分批处死动物将标本取出,并定量检测其内BMP-2浓度.结论:BMSCs在转染BMP-2基因后可以持续、有效的表达BMP-2,并有较强的诱导成骨能力.TCP在BMP-2基因给药中是良好的细胞载体.hBMP-2基因修饰的组织工程化人工骨可以修复早期股骨头无菌性坏死,有望为临床股骨头无菌性坏死的治疗提供一种新的方法.

目录

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引言

第一部分BMP-2基因转染的骨髓间充质干细胞诱导成骨的体外研究

第一节扫描电镜观察细胞载体TCP(磷酸三钙)与羊骨髓间充质干细胞的复合情况

第二节ELISA定量检测细胞培养上清中BMP-2浓度

第二部分BMP-2基因转染的BMSCs修复羊股骨头无菌性坏死的研究

第一节建立股骨头无菌性坏死动物模型

第二节BMP-2基因转染的骨髓间充质干细胞修复羊股骨头无菌性坏死

第三节ELISA定量检测组织工程化人工骨内BMP-2浓度

全文结论

参考文献

致谢

综述

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