当归补血汤对骨髓抑制小鼠造血调控的实验研究

摘要

目的：骨髓抑制是肿瘤患者放化疗后，骨髓造血功能损害为主的毒副作用。为了更好地服务于临床，寻求降低放化疗毒副作用的中药复方制剂，本实验首次深入全面地探讨了当归补血汤的配伍原则、补气益血的机制及不同剂型的当归补血汤对造血机能的影响。 方法：应用造血祖细胞培养术、免疫组织化学、流式细胞术、蛋白免疫印迹法、酶联免疫吸附法以及RT-PCR 等技术，从骨髓造血微环境中的基质细胞、细胞外基质、细胞因子对造血干细胞的影响着手，从信号转导的角度探讨补气益血的分子学机制。为补气益血的中医理论提供实验室依据。 结果：1、当归补血汤能提高骨髓抑制小鼠外周血像、骨髓有核细胞数及造血干/祖细胞体外培养集落产率，能促使造血干/祖细胞进入细胞增殖周期。 2、当归补血汤能改善骨髓抑制小鼠细胞因子的表达，尤其能有效调节TPOmRNA的表达，促使血小板-TPOmRNA-TPO-TPOR 达到自稳状态；同时还能提高骨髓抑制小鼠G-CSFmRNA的表达，并呈量效正相关。 3、当归补血汤能增强骨髓抑制小鼠骨髓基质细胞的活性；并通过促进骨髓基质中FN、LN的表达，抑制MMP-2、MMP-7的表达改善造血干/祖细胞的黏附和归巢；同时增强骨髓基质中IL-10的表达，促进早期造血干/祖细胞的增殖。 4、当归补血汤可上调骨髓抑制小鼠骨髓基质细胞及骨髓细胞TGF-β1及Smad3 信号蛋白的表达，其调节具有双向性。 5、当归补血汤标准汤剂、整方颗粒（黄芪：当归=5：1、黄芪：当归=1：1）、颗粒配方（黄芪：当归=5：1）均能改善骨髓抑制小鼠造血机能，但配方颗粒的疗效似更佳。 结论：当归补血汤确能改善骨髓抑制小鼠的造血机能，其途径主要是通过改善骨髓造血微环境中基质细胞、细胞外基质蛋白质的表达及细胞因子Mrna的表达来调节造血干/祖细胞的增殖和分化；“补气益血”的经典中医理论是有物质基础的，TGF-β/Smad 信号转导介导了补气益血的分子学机制；当归补血汤现代中药配方颗粒在改善骨髓抑制小鼠造血功能方面，功效优于传统汤剂。

目录

文摘

英文文摘

前言

论文说明:缩略词表

声明

第一部分 当归补血汤对骨髓抑制小鼠外周血和骨髓造血祖细胞调控的实验研究

第二部分 当归补血汤对骨髓抑制小鼠造血生长因子EPO、TPO、GM-CSFmRNA影响的实验研究

第三部分 当归补血汤对骨髓抑制小鼠造血微环境影响的实验研究

第四部分 当归补血汤对骨髓抑制小鼠骨髓细胞和基质细胞TGF-β1/Smad3信号转导影响的实验研究

第五部分 标准当归补血汤煎剂和当归补血汤颗粒剂对骨髓抑制小鼠造血调控研究比较

参考文献

结 论

致 谢

造血微环境对造血调控的研究进展

细胞环境在干细胞体外培养中的应用

在校期间发表的论文、论著及科研项目