自体疫苗对金黄色葡萄球菌痤疮模型及皮肤微生态影响的实验研究

摘要

目的:
　　探索自体疫苗对金黄色葡萄球菌所致痤疮的治疗效果及对皮肤微生态的影响。
　　方法:
　　1.选择临床常用中药黄芩、连翘、苦参、白花蛇舌草，中药组方五味消毒饮，及西药盐酸克林霉素、甲硝唑，采用常量肉汤稀释法和琼脂法，测定其对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,S. aureus）的抗菌效果，分别从中、西药组中选取最低抑菌浓度值（minimum inhibitory concentration，MIC）最小者，为后续试验药物；
　　2.选择雄性日本大耳白兔30只，随机分为空白组、对照组、中药组、西药组、疫苗组5组，每组6只。除空白组外，其余组别运用经典痤疮造模方法Kligman法[1]，于兔左耳耳管开口处，涂擦煤焦油及皮下注射S. aureus菌液，建立痤疮模型；
　　3.造模成功后，分别予中、西药组涂擦药物，1日/次；疫苗组注射疫苗，5日/次；对照组涂擦生理盐水，1日/次。分别于治疗第5、10、15天，肉眼观察造模处皮肤情况。于第15日空气栓塞处死动物，取造模处皮肤组织，采用 HE染色方法观察组织形态；
　　4.采集造模处皮肤表面细菌，采用16S rDNA技术检测皮肤微生态多样性。
　　结果:
　　1.中、西药对S. aureus的抑制效果中药黄芩、连翘、苦参、白花蛇舌草及中药组方五味消毒饮中，连翘抑菌效果最佳，MIC值为0.0078125g/ml；西药克林霉素及甲硝唑中，克林霉素抑菌效果最佳，MIC值为0.0078125μg/ml。
　　2.成功建立兔耳S. aureus痤疮模型每日于兔耳内侧皮肤涂擦煤焦油0.5ml，1日/次，并皮下注射9×108CFU/mlS. aureus菌液0.1ml，3日/次，15日后可成功建立兔耳S. aureus痤疮模型。
　　3.自体疫苗对家兔S. aureus所致痤疮治疗效果对S.aureus所致痤疮模型而言，西药组对局部痤疮治疗效果最佳，疫苗组次之，连翘水煎液治疗效果不明显。
　　4.自体疫苗对家兔 S. aureus所致痤疮皮肤微生态的影响疫苗的使用能改善兔耳皮肤微生态，降低皮肤表面致病菌梭形杆菌属、分枝杆菌属、分枝杆菌科的丰度；但就葡萄球菌属而言，相对于西药克林霉素能降低皮肤表面葡萄球菌属（P=0.028）和葡萄球菌目（P=0.036）丰度，疫苗及连翘水煎液对葡萄球菌的改变无统计学意义（P＞0.05）
　　结论:
　　自体疫苗能明显减轻痤疮症状、改善兔耳皮肤微生态组成、降低皮肤表面致病菌梭形杆菌属、分枝杆菌属、分枝杆菌科的丰度，但对葡萄球菌属丰度的改变无明显作用。

目录

缩略词表

前言

实验一、临床常用中、西药及中药组方对金黄色葡萄球菌的抗菌效果

1.实验材料

2.实验用药的制备

3.实验方法

4.实验结果

5.实验结论

实验二、金黄色葡萄球菌所致痤疮模型的建立

1.实验材料

2.实验用菌悬液的制备

3.实验方法

4.实验结果

5.实验结论

实验三、自体疫苗对家兔金黄色葡萄球菌所致痤疮的治疗效果

1.实验材料

2.实验药物及自体疫苗的配制

3.实验方法

4.实验结果

5.实验结论

实验四、自体疫苗对家兔金黄色葡萄球菌所致痤疮皮肤微生态的影响

1.实验材料

2.常用试剂的配制

3.实验方法

4. 生物信息分析及统计分析

5.实验结果

6.实验结论

讨论

1. 药物选择依据

2.S．areus对痤疮的影响

3.兔耳痤疮模型建立依据

4.自体疫苗对痤疮的治疗效果

5.自体疫苗对皮肤微生态的影响

结论

问题与展望

致谢

参考文献

综述:痤疮的局部药物治疗研究进展

在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果

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