穿心莲内酯的提取及纯化工艺研究

摘要

穿心莲为解毒消炎类临床常用药。大量的药理研究发现，穿心莲中的脂溶性成分穿心莲内酯不仅具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗癌、抗心血管疾病。 本论文以酶解前处理超声提取法作为穿心莲内酯的提取方法，以大孔树脂纯化法作为穿心莲提取液的纯化方法，以穿心莲内酯的提取率以及纯度为评价指标，具体的工艺条件与试验结论如下： 影响穿心莲内酯提取率的因素大小顺序为：乙醇浓度>提取温度>料液比>提取时间。超声提取较优的工艺条件为：当温度为50℃，每50g穿心莲加入1300U的纤维素酶，控制酶解环境pH=4左右，酶解100min，酶解溶液滤过以后，往滤渣中加入浓度为75﹪，体积为原料10倍的乙醇超声提取20min。未加酶解的超声提取的穿心莲内酯的提取率为79.84﹪，出膏率为7.43﹪，酶解超声提取的穿心莲内酯的提取率达到98.09﹪，出膏率为8.91﹪，与酶解前相比，内酯提取率有明显的提高，而出膏率并没有明显的增加，即药材中的水溶型杂质基本没有被提取出来，对后续的纯化工艺没有大的影响。 采用DA201-B型大孔树脂为纯化穿心莲内酯的最佳树脂，通过树脂动态吸附实验考察了吸附流速、解吸流速、上柱液pH、洗脱液浓度等因素对吸附效果的影响，最终确定最佳的吸附工艺条件为：吸附流速为1BV/h，上柱液不调节pH，在最佳吸附工艺条件下，树脂对穿心莲提取液的处理量大约达到树脂体积的21倍，22BV流出液内酯泄漏率达到9.77﹪，所以从22BV开始停止对上柱液进行吸附，此时树脂有效吸附量为13.42mg/ml<,湿树脂>，内酯得率为90.25﹪。最佳解吸工艺条件为：60﹪pH=5的乙醇，解吸流速为3BV/h，解吸率为84.95﹪。提取液的干膏收率由纯化前的8.91﹪降低到3﹪，而穿心莲内酯的纯度由纯化前24.98﹪提高到了65﹪，本纯化工艺的内酯保留率为85﹪以上。 本论文对穿心莲内酯的提取纯化工艺进行了相关研究，获取了相对以往方法提高提取率、缩短提取时间、提高内酯纯度的工艺路线，为穿心莲内酯进一步开发利用以及尽量减少临床使用不良反应提供了有益的参考。

目录

文摘

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第1章引言

1.1研究意义

1.2研究目标

1.3研究内容

1.4研究现状

1.4.1穿心莲的性状

1.4.2穿心莲的化学成分

1.4.3穿心莲内酯的理化性质及结构

1.4.4穿心莲内酯的药理作用

1.4.5临床应用

1.4.6穿心莲内酯提取工艺的研究进展

1.4.7有效成分纯化工艺研究进展

1.4.8萜内酯提取纯化研究进展

1.4.9定量测定方法研究进展

1.5研究目标

1.6论文的课题来源和主要成果

第2章实验材料与方法

2.1实验仪器以及材料

2.1.1主要仪器

2.1.2材料试剂

2.2检测方法

2.2.1高效液相色谱的检测原理

2.2.2色谱条件

2.2.3线性关系

2.2.4精密度试验

2.2.5重复性试验

2.2.6稳定性试验

第3章穿心莲内酯的提取纯化工艺研究

3.1工艺路线的设计

3.2药材鉴别

3 2.1浸出物含量测定

3.2.2穿心莲全草中内酯总含量测定

3.3穿心莲内酯超声提取工艺条件筛选

3.3.1提取次数对提取率的影响

3.3.2乙醇浓度对提取率的影响

3.3.3料液比

3 3.4温度

3.3.5提取时间

3.3.6正交试验

3.4纤维素酶解前处理工艺条件筛选

3.4.1加酶量的影响

3.4.2酶解温度的影响

3.4.3酶解时间的影响

3.4.4酶解pH的影响

3.4.5正交分析

3.5验证实验

3.6小结

3.7大孔树脂纯化工艺研究

3.7.1树脂筛选

3.7.2树脂吸附条件筛选

3.7.3树脂洗脱条件筛选

3.7.4验证实验

3.7.5穿心莲提取溶液纯化前后HPLC图谱对比

3.8小结

结论

致谢

参考文献