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第1章 与血管平滑肌细胞联合培养内皮细胞的粘附
1.1 引言
1.2 实验材料及仪器
1.2.1 实验仪器
1.2.2 试剂
1.2.3 主要溶液成分及配制
1.3 实验方法
1.3.1 细胞培养与鉴定
1.3.2 ECs和VSMCs(或FBs)的联合培养模型
1.3.3 实验分组
1.3.4 24孔培养板的预处理
1.3.5 细胞粘附实验
1.3.6 细胞粘附抑制实验
1.3.7 蛋白提取
1.3.8 蛋白免疫印迹实验(western blot)
1.3.9 免疫荧光检测(confocal micracopy)
1.3.10细胞FAs面积的测定
1.3.11多聚微管和微管单体的提取方法
1.3.12统计学方法
1.4 实验结果
1.4.1 原代培养的ECs、VSMCs和FBs形态学观察及鉴定
1.4.2 VSMCs诱导ECs粘附
1.4.3 VSMCs诱导ECs的FAs形成
1.4.4 VSMCs促进ECs的FAs面积增加
1.4.5 VSMCs对ECs微管聚合的影响
1.4.6 VSMCs对ECs p-paxillin和ERK1/2 MAPK信号通路活化的影响
1.4.7 ERK1/2 MAPK信号通路参与调节VSMCs诱导ECs的paxillin激活
1.4.8 TSA改变微管稳定性,抑制VSMCs诱导的ECs粘附
1.4.9 TSA抑制了VSMCs对联合培养ECs的ERK1/2和paxilliu活化
1.5 讨论
1.5.1 VSMCs诱导ECs粘附
1.5.2 与VSMCs联合培养ECs的粘附机制探讨
第2章 切应力对与血管平滑肌联合培养内皮细胞迁移的影响及其细胞骨架机制
2.1 引言
2.2 实验材料
2.2.1 实验仪器
2.2.2 试剂
2.2.3 主要溶液成分及配制
2.3 实验方法
2.3.1 细胞培养
2.3.2 用于VSMCs和ECs联合培养的平行平板流动腔系统
2.33 实验分组
2.3.4 细胞迁移实验
2.3.5 HDAC6 RNA干扰实验
2.3.6 蛋白提取
2.3.7 蛋白免疫印迹实验
2.3.8 统计学方法
2.4 实验结果
2.4.1 切应力和VSMCs可以诱导ECs的迁移
2.4.2 VSMCs诱导ECs的HDAC6激活
2.4.3 HDAC6的表达改变伴有微管乙酰化水平降低
2.4.4 VSMCs对ECs中HDAC6和微管乙酰化表达的影响呈时间依赖性
2.4.5 HDAC6和微管乙酰化调控ECs的迁移
2.4.6 切应力抑制与ECs联合培养的VSMCs的CTGF的表达
2.5 讨论
2.5.1 切应力对与VSMCs对联合培养ECs迁移的影响
2.5.2 VSMCs对ECs迁移的调控途径
2.5.3 切应力对ECs迁移的调控机制
全文小结
参考文献
文献综述
切应力对血管内皮细胞迁移的影响及其相关机制
参考文献
致谢
攻读博士学位期间已发表和修回的学术论文