轻度认知障碍和阿尔茨海默病外周血生化标志物的探索研究

摘要

本文从以下两个部分来展开论述：
　　 第Ⅰ部分遗忘性轻度认知障碍的神经心理学量表及影响因素分析
　　 目的：筛选适合中国人的具有高度敏感性和特异性的神经心理学量表。
　　 内容与方法：对2008.4～2009.4上海及周边地区150例正常老年人和150例遗忘型轻度认知障碍(aMCI)统一进行简易智能检查量表(MMSE)、中文版蒙特利尔认知评估(MoCA-C)和听觉词语学习测验(AVLT)、临床痴呆量表(CDR)、工具性日常生活活动能力量表(IADL)Hachinski缺血指数量表的评估，对量表中包含的画钟实验(CDT)进行定量和定性分析，比较和评估这几种量表的优势和不足以及aMCI患者的认知水平特点。采集静脉抗凝全血提取基因组DNA，应用基因测序方法分析受试者ApoE基因分型，分析ApoEe4对受试者认知功能的影响。采用SPSS16.0统计软件进行分析。
　　 结果：aMCI患者MMSE、MoCA-C、AVLT等神经心理学量表评分低于正常老年人；aMCI组中非 ApoEε4基因携带者评分高于ApoEε4基因携带者。CDT的Mendez、Rouleau、Freund评分方法无法有效鉴别MCI和正常对照。而评估钟表知识缺陷A(P=0.005)、空间规划缺失-C(SPD-C)(P=0.007)、刺激界限反应(SBR-A)(P=0.037)、SPD-A(P=0.033)等画钟实验的错误类型可以在门诊用于MCI的筛查，特异度和敏感度分别为75％和77％。
　　 结论：本实验采用的神经心理学量表组合可以准确的鉴别aMCI，另外ApoE基因影响aMCI患者认知水平，但是作用的机制和大小尚不清楚。画钟实验的错误类型可以用于门诊初步、快速的鉴别MCI患者。
　　 第Ⅱ部分研究aMCI和AD炎性因子和血小板中凋亡相关蛋白变化
　　 目的：探讨aMCI血清中炎性因子是否适合作为生物标记物；探讨aMCI和AD患者血小板中是否存在Aβ代谢相关酶及凋亡相关蛋白的异常，期望为血小板成为AD和MCI凋亡研究的外周模式提供理论基础，期望找到适合AD早期诊断的生物化学标记物。
　　 方法：150例正常老年对照和150例aMCI患者在进行了神经心理学量表评分后，采用ELISA方法进行血清IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α的测定，分析aMCI和正常对照之间是否存在炎性因子水平的差异。并分析ApoE基因、IL-6基因、TNF-α基因和IFN-γ基因对外周血液炎性因子水平的影响，分析炎性因子与神经心理学量表评分之间的相关性。从抗凝血中提取血小板，用western blot的方法测量50例正常老年对照、50例aMCI和50例 AD患者血小板BACE1和ADAM10，观察血小板中是否存在Aβ代谢相关酶的表达异常。用western blot的方法测量血小板中caspase-3、caspase-9、Bad、Bax、Bcl-2和Bcl-2L等凋亡相关蛋白，研究血小板中是否存在异常凋亡，为血小板作为AD和MCI凋亡研究的外周模式提供佐证，也为外周血生化指标的筛选提供前期理论依据。
　　 结果：低危组aMCI患者炎性因子高于正常老年人；高危组aMCI患者和低危组之间有统计学差异；IL-6与认知水平呈负相关。aMCI患者和AD患者血小板中BACE1蛋白表达增高、ADAM10蛋白表达降低。aMCI患者和AD患者血小板中caspase-3、caspase-9、Bad和Bax等凋亡蛋白表达增加，而抗凋亡蛋白在AD中表达减少。
　　 结论：炎性因子不适合独立作为生物标记物，但是可以与其他生物标记物联合使用提高诊断的准确性。血小板存在异常凋亡，可以作为AD和MCI凋亡研究的外周模式。