体外构建组织工程化上皮—肌性细胞复合物修复犬尿道缺损的实验研究

摘要

目的：探讨体外构建组织工程化上皮—肌性细胞复合物的可行性，并尝试将其体内回植修复犬尿道缺损。
　　方法：酶消化法获取犬脂肪干细胞，将其种植于聚羟基乙酸（PGA）材料上，形成细胞—材料复合物，应用诱导培养液进行成肌诱导3周，观察细胞生长情况及形态变化；同时应用混合酶消化法获取犬口腔黏膜上皮细胞，将上皮细胞悬液均匀滴加于细胞—材料复合物的一面，扫描电镜观察上皮细胞生长情况，培养1周后，肉眼观察上皮—肌性细胞复合物大体形态，HE染色检测其中的细胞分布，免疫荧光鉴定上皮—肌性细胞复合物中的细胞类型；最后应用此复合物体内回植修复6只犬各1cm长度的前尿道缺损，术后通过尿道造影、大体解剖和组织学检测评估修复效果。
　　结果：酶消化法可成功分离获取犬脂肪干细胞及犬口腔黏膜上皮细胞，脂肪干细胞复合 PGA后生长良好，并可在体外完成成肌诱导，形成细胞—材料复合物；且上皮细胞和成肌细胞可共培养于混合培养液中，体外条件下能成功构建出上皮—肌性细胞复合物；6只犬前尿道缺损的修复效果良好。
　　结论：本研究进一步证明了脂肪干细胞复合 PGA材料体外成肌诱导的可行性，选用口腔黏膜上皮细胞体外模拟构建出初步成熟的上皮—肌性细胞复合物，并用其成功修复了犬尿道缺损，为泌尿外科组织工程的修复重建提供了新的思路。

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绪论

参考文献

第一部分 犬口腔黏膜上皮细胞亚群的实验研究

前言

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

第二部分 体外构建组织工程化上皮—肌性细胞复合物

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

第三部分 上皮—肌性细胞复合物修复犬尿道缺损

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

全文结论

附录：综述:从临床到基础：组织工程尿道临床运用的反思

致谢

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