胸主动脉瘤中AT2受体阳性T细胞亚群的分离鉴定及其功能研究

摘要

研究目的:
　　胸主动脉瘤是临床高发大血管疾病之一，其病因复杂，但都具有共同的病理生理过程，即主动脉中层结构的破坏，基质崩解、细胞丢失、炎症反应。研究证明与炎症、凋亡、纤维化密切相关的AT2受体(AT2R)蛋白在主动脉瘤组织中有高表达，我们的前期研究结果也发现AT2R在胸主动脉瘤组织中表达量升高，为了解AT2R升高在疾病发生发展中的意义，本课题拟以临床样本为研究材料探索胸主动脉瘤中AT2R阳性细胞的亚群类型及其对疾病病理的影响。
　　材料与方法:
　　本课题筛选了病理组20人和对照组40人，对保存的主动脉组织和外周血采用PCR、免疫荧光和流式细胞的方法进行分析，通过流式分选得到目的细胞后用PCR分析其细胞因子的分泌，并在与内皮细胞共培养后采用PCR、免疫荧光以及划痕实验检测内皮细胞的功能改变。
　　结果:
　　1.统计分析排除了入组人群年龄、性别、血压、糖尿病、肾病对结果的影响。经实验可知动脉瘤结构破坏及平滑肌细胞丢失，巨噬细胞相关细胞因子在胸主动脉瘤组织中的表达量高于对照组，且可以看到大量CD3+细胞;同时还发现异常增多的CD31+细胞，不仅密度增高，而且分泌更多的基质金属蛋白酶2(MatrixMetalloproteinase, MMP2)。
　　2.前期研究发现AT2R基因在胸主动脉瘤组织中明显高表达后，经鉴定，AT2R+细胞为CD3+CD4+AT2R+细胞，即CD4+AT2R+T细胞后，又进一步明确患者循环系统亦有CD4+AT2R+T细胞大量存在，并且相比于对照组明显增高。
　　3.通过CD4+AT2R+T细胞的PCR分析，促炎因子IL-1β、IL-17b分泌量远小于CD4+AT2R-T细胞，而抑炎因子IL-10相反。
　　4.经过共培养，我们发现CD4+AT2R+T细胞促进了内皮细胞的凋亡，抑制了增殖和MMP2的产生，分泌的炎性因子明显减少，而且细胞的迁移能力明显减弱。
　　结论:
　　在本研究中，我们发现了胸主动脉瘤患者体内一类新的T细胞亚群，CD4+AT2R+T细胞。该细胞亚群通过抑制内皮细胞增殖，促进凋亡，减弱迁移能力和MMP2分泌，以及自身炎症因子的调节，直接或间接干扰炎症反应的中间环节，最终对胸主动脉瘤主动脉组织起保护作用。本研究加深了我们对胸主动脉瘤病理生理过程的理解并且为今后药物治疗胸主动脉瘤提出了新的设想和方案。

目录

声明

摘要

缩略词表

绪论

第一章 胸主动脉瘤炎症下病理学及细胞学研究

1．1 材料与方法

1．2 结果与分析

1．3 讨论

1．4 小结

第二章 胸主动脉瘤中AT2受体阳性细胞所属亚群的探索

2．1 材料与方法

2．2 结果与分析

2．3 讨论

2．4 小结

第三章 AT2R阳性细胞的分离培养以及表型分析

3．1 材料与方法

3．2 结果与分析

3．3 讨论

3．4 小结

第四章 CD4+AT2R+T细胞对内皮细胞的影响

4．1 材料与方法

4．2 结果与分析

4．3 讨论

4．4 小结

第五章 总结与创新

参考文献

致谢

作者简历及取得的科研成果