浦东白猪Mx1基因外显子14和Nramp1基因内含子6可能的免疫相关位点基因突变及免疫性能检测与分析

摘要

浦东白猪是上海浦东和奉贤地区的地方性猪种，由当地农户长期选育而成，具有繁殖率高、肉质鲜美等特点。浦东白猪作为我国唯一的全白色地方猪种，具有非常重要的遗传资源保护价值。可是浦东白猪却曾经因为不适合工业化养殖而濒临消失。现在工业化养殖业的暴露出越来越多的药物滥用、传染病大流行和肉质口感下降等问题。利用全国各地区的地方良种猪资源与大型猪场饲喂的主流猪种进行差异化的新猪种培育是应对这些问题的一个有效方法。对浦东白猪开展遗传特性和免疫性能的研究，既可以帮助我们更好的利用它的遗传资源,也能帮助浦东白猪的种源保护。
　　Mx1基因与动物对流感病毒和水泡性口炎病毒等多种的抵抗力相关，而Nramp1基因与动物对胞内病原体感染疾病的抵抗力相关。这2个基因成为近年比较热门的备选抗病基因。国内外的诸多研究已经证明M x1基因第14外显子和Nr amp1基因第6内含子上的基因突变对猪的免疫性能有影响。研究浦东白猪这2个基因片段和相关天然抗病能力，既能够帮助了解浦东白猪的遗传特性和相关性能，还可以促进Mx1基因和Nramp1基因的抗病作用研究。
　　对浦东白猪种群进行随机抽样，扩增Mx1基因第14外显子和N ram p1基因第6内含子的片段并进行基因测序的结果显示浦东白猪的基因片段具有较多的突变位点，其中大部分突变位点未在其它猪种发现过：
　　1、M x1基因第14外显子的序列中发现第47b p处的C碱基缺失，49 bp处的A碱基缺失，54bp处的C碱基缺失，63b p处的A碱基缺失，76 bp的A→G以及146b p的T→C,共6处位点突变。
　　2、Nra mp1基因第6内含子的序列中发现259bp处的A→G改变，363 bp处的G→A改变和在29bp之后的1-2个T碱基插入等3处位点突变。对相同猪场的浦东白猪群体与大白猪群体随机抽样并检测血清中的与所选抗病基因相关的免疫学指标的水平，结果显示：两个猪种群体间在血清中的白细胞介素4、白细胞介素12和干扰素γ水平EL ISA检测结果均不存在显著差异（P＞0.05）。
　　浦东白猪是一种非常有特点的地方猪种，其基因组相对其它猪种很多的独特位点突变，只是在相关免疫学指标检测的结果中没有发现浦东白猪在相关天然抗病性能上的独特性。研究结果初步表明,浦东白猪虽然在M x1基因第14外显子和Nra mp1基因第6内含子上的变异位点与大白猪有差异,但浦东白猪相关免疫性能方面与大白猪没有显著差异,而类似的研究在浦东白猪尚属首次报道。这些发现既可以为未来的浦东白猪天然抗病性能研究和遗传育种研究提供一定的数据基础，也对更清晰的认识M x1基因和Nra mp1基因的抗病能力有一定作用。

目录

第一章 文献综述

1. 1浦东白猪及其种群概况

1. 2 Mxl基因研究概况

1.3 Nrampl基因研究概况

1. 4动物转基因育种技术

1. 5研究的目的和意义

第二章 浦东白猪Mx1基因外显子14及Nramp1基因内含子6的基因序列测定

2.1前言

2.2实验材料

2.3实验步骤

2.4实验结果

第三章 浦东白猪和大白猪的3个免疫指标比较研究

3.1前言

3.2实验材料

3.3酶联免疫吸附检测

3.4实验及分析结果

第四章 讨论

4.1浦东白猪基因序列测定结果分析

4.2白细胞介素4、白细胞介素12和干扰素γ对比结果分析

4.3浦东白猪在抗病育种中的作用和意义

第五章 结论

参考文献

攻读硕士学位期间发表论文

附录1

致谢

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