草鱼免疫器官个体发育的组织结构和免疫细胞变化

摘要

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)是我国重要的淡水养殖鱼类,但是近年来各种疾病草鱼出血病、烂鳃病、赤皮病的发生严重影响了草鱼养殖,对草鱼免疫系统的研究不仅在系统发育方面具有重要意义,在鱼病防治方面也具有重要的实际应用价值。因此本论文对草鱼免疫器官的组织结构、免疫器官的个体发育和其间免疫细胞的分布进行了研究。
　　本文利用 HE(伊红-苏木素)染色方法全面系统地研究了草鱼的免疫器官—胸腺、肾脏(头肾和体肾)、脾脏的组织结构和免疫细胞(IgM阳性细胞、IgZ阳性细胞和PAS(过碘酸雪夫氏染色)阳性细胞)分布。草鱼胸腺位于鳃腔背上角深处,紧贴在鳃腔膜下。胸腺具有典型的淋巴组织结构:每个胸腺小叶分为皮质和髓质;具有黑色素巨噬细胞中心及血胸屏障,无哈氏小体。草鱼的头肾主要集中于肾脏前部:头肾是由基质组织网络着不同发育阶段的血细胞构成,无肾小球,分淋巴细胞聚集区、粒细胞聚集区及肾上腺组织区,无甲状腺分布。体肾由中肾(包括肾单位,集合小管和集合管)和含有丰富造血细胞的肾间质即拟淋巴组织两部分组成;无斯坦尼斯小体。脾脏被薄层结缔组织分为许多脾小叶,脾小叶主要成分为血管系统和脾髓;血管系统有大量椭圆体及毛细血管,脾髓中有较多黑色素巨噬细胞中心,无淋巴小结,无明显的红髓和白髓区分;在脾脏间质中有胰脏组织。运用 PAS(过碘酸雪夫氏染色)、SP(抗生物素蛋白-过氧化酶)免疫组化等研究进一步表明,IgM和PAS阳性细胞阳性细胞数量由多到少依次为:头肾、脾脏、体肾、胸腺;IgZ阳性细胞细胞数量由多到少依次为头肾、胸腺、体肾、脾脏。
　　应用常规石蜡切片及HE染色研究了草鱼初孵仔鱼至103dph(出膜后日龄)幼鱼的免疫器官:肾脏(头肾和体肾)、胸腺、脾脏的发育。结果表明,免疫器官原基出现的先后顺序是胸腺(4dph)、头肾(6dph)和脾脏(6dph)。免疫器官出现小淋巴细胞顺序是胸腺(6dph)、头肾(7dph)和脾脏(7dph)。草鱼胸腺在19dph已形成类似哺乳动物胸腺的皮质和髓质的结构,随着发育胸腺分化出胸腺小叶。草鱼肾脏的发育大体上分两个阶段:前肾期;头肾和中肾期;草鱼肾脏从前肾朝头肾和中肾两个不同的方向发育,头肾逐渐发育为具有免疫组织及肾上腺组织的混合型器官,中肾形成比前肾更先进的泌尿结构伴随拟淋巴组织的增殖。脾脏发育伴随着胰腺组织由外围包裹逐渐深入脾脏结缔组织间的过程。间充质细胞及造血干细胞逐渐分化由血细胞特别是红细胞及血管系统组成的脾脏,脾脏再分化出大量的脾小叶结构。75dph左右,各免疫器官已具有基本完整的组织结构。
　　利用SP免疫组学技术检测到IgM阳性细胞首先在17dph出现在草鱼头肾、体肾和脾脏中检测到,在胸腺中IgM阳性细胞出现的比较晚,大约65dph开始出现;IgZ阳性细胞(18dph)最早在草鱼的体肾拟淋巴组织中的分布;随后出现在脾(25dph)、头肾(27dph)和胸腺(103dph)。阿利新蓝-过碘酸雪夫氏染色染色(AB-PAS)的PAS阳性细胞出现时间如下:脾脏(6dph),头肾和体肾(7dph)及胸腺(11dph),其不同器官同日龄数量由多到少为头肾、体肾、脾脏、胸腺。
　　总之,依据免疫器官的组织结构及阳性细胞的分布情况及草鱼免疫器官早期发育可以分为四个阶段:1-5dph,未见免疫相关细胞;6-16dph,具有参与非特异性免疫反应的细胞基础;17dph-75dph,不但具有非特异性免疫反应细胞而且具有参与特异性免疫反应的细胞基础,两者共同增殖;75dph以后,免疫系统的组织结构发育基本完全并继续完善,免疫细胞继续成熟分化。

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引言

1鱼类免疫器官

2 鱼类免疫细胞

3 免疫球蛋白

4 目的和意义

第一章 草鱼成鱼免疫器官的组织结构及免疫细胞的分布

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

第二章 草鱼免疫器官个体发育的组织学观察

1 材料与方法

2方法

3 结果

4 讨论

第三章 草鱼免疫器官的个体发育中免疫细胞的分布

1 材料

2方法

2 结果

3讨论

全文总结

参考文献

附录

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