清脑通脉胶囊对糖尿病性脑梗死大鼠脑匀浆中NO、NOS的影响的实验研究

摘要

目的：观察清脑通脉胶囊对糖尿病性脑梗死(DACI)大鼠血糖、糖尿病症状及神经功能缺失的改善情况，并从该药对DACI大鼠脑匀浆一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的影响探求其作用机制，从而为本药的临床应用提供科学的理论依据。 方法：采用链脲佐菌素制造糖尿病模型，血糖≥11.1mmol/L者4周后，建立大脑中动脉阻塞(MCAo)模型，存活大鼠纳入本实验。60只大鼠被随机分为模型组、清脑通脉小剂量组(以后简称小剂量组)、清脑通脉中剂量组(以后简称中剂量组)、清脑通脉大剂量组(以后简称大剂量组)及血塞通组(以后简称对照组)。另取12只注射等量柠檬酸缓冲液且只分离颈总动脉未结扎的大鼠作为假手术组。各组于造糖尿病模当天开始记录食量、饮水量、尿量及体重，每周进行一次统计：每组动物分别在造糖尿病模后、造卒中模后和给药2周后检测血糖；每组动物分别在给药前、给药后1周、给药后2周进行细横木平衡实验和粘着去除实验。在最后一次行为学评分后，处死动物，留取标本，分别采用硝酸还原酶反应法和L-精氨酸胍基氧化反应法检测脑匀浆一氧化氮(NO)含量及一氧化氮合酶(NOS)活性。脑匀浆蛋白含量采用考马斯亮兰法测定。 结果：DACI模型大鼠表现出明显的“三多一少”(即食量、饮水量、尿量增多及体重减轻)症状。给药后，模型大鼠的上述症状有所改善，但各组间相比P>0.05，无统计学意义；给药后，大剂量组、中剂量组、小剂量组、对照组模型大鼠的血糖均有一定程度的下降，大剂量组与模型组比P<0.05，小剂量组、中剂量组、对照组与模型组比P均>0.05，说明大剂量清脑通脉胶囊可降低血糖，但对糖尿病典型症状的改善不明显。DACI模型大鼠出现神经功能缺损，给药前各行为学测试结果，模型组、大剂量组、中剂量组、小剂量组、对照组与假手术组比P均<0.01。神经功能缺损在给药2周后仍有不同程度的遗留，模型组、大剂量组、中剂量组、小剂量组、对照组与假手术组比P均<0.01；大剂量组、中剂量组、小剂量组、对照组与模型组比P均<0.05，说明清脑通脉胶囊与血塞通均可在一定程度上促进神经功能的恢复；大剂量组、中剂量组与对照组比P<0.01，而小剂量组与对照组比P>0.05，说明大中剂量清脑通脉胶囊的神经功能改善效果优于血塞通。对大鼠脑匀浆中一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合酶(NOS)活性的检测发现，模型组、大剂量组、中剂量组、小剂量组、对照组的各项指标均高于假手术组(P均<0.01)，大剂量组、中剂量组、小剂量组、对照组的各项指标与模型组相比有不同程度的下降(P均<0.05)，大剂量组、中剂量组与对照组比P均<0.05，有统计学意义。 结论：DACI模型大鼠出现血糖升高、“三多一少”糖尿病典型症状以及不同程度的神经功能缺损表现。通过清脑通脉胶囊的治疗，能够一定程度上降低血糖，减轻神经功能缺损症状。大剂量清脑通脉胶囊的治疗效果优于血塞通。清脑通脉胶囊治疗糖尿病性脑梗死的机理可能是：通过抑制内皮细胞、星形胶质细胞、脑巨噬细胞表达一氧化氮合酶(NOS)，减少一氧化氮(NO)释放，减轻内皮细胞损伤与氧化应激。

目录

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引言

1.材料与方法

1.1实验药物

1.2动物

1.3仪器与试剂

1.3.1动物模型制作所用仪器与试剂

1.3.2血糖检测所用仪器与试剂

1.3.3 NO、NOS检测所用仪器及试剂

1.4方法

1.4.1行为学测试材料与方法

1.4.2 NO检测原理与方法

1.4.3 NOS检测原理与方法

1.4.4脑匀浆蛋白含量测定原理与方法

1.5统计方法

2结果

2.1清脑通脉胶囊对糖尿病脑梗死模型大鼠糖尿病症状的影响

2.2行为学测试结果

2.2.1细横木平衡实验

2.2.2粘着去除实验

2.3血糖检测结果

2.4脑匀浆N0、NOS检测结果

3讨论

3.1有关理论方面的探讨

3.1.1“消渴-中风”一源两歧

3.1.2“消渴-中风”的病机演变

3.1.3中医药治疗“消渴-中风”的概况

3.2清脑通脉胶囊简介

3.2.1处方来源：黄连温胆汤加减

3.2.2处方组成

3.2.3功效

3.2.4适应症

3.2.5处方分析

3.2.6现代药理研究

3.3有关实验方面的讨论

3.3.1链脲佐菌素腹腔注射+大脑中动脉闭塞(MCAo)模型是制备DACI动物模型较为成熟的方法

3.3.2脑匀浆中NO含量及NOS活性与糖尿病性脑梗死的关系

3.3.3动物模型神经功能缺损的测评

4结论

结语

参考文献

附录

致谢