强骨颗粒含药血清对破骨细胞增殖及活性的影响

摘要

目的：本实验通过体外分离、培养新生大鼠破骨细胞，研究大鼠的含强骨颗粒药物血清对体外培养的破骨细胞增殖及骨吸收活性的影响，从细胞生物学角度深入研究中药强骨颗粒对骨质疏松症的治疗作用机理，探讨强骨颗粒是否是通过抑制破骨细胞的增殖、降低破骨细胞的骨吸收活性来发挥其抗骨质疏松的作用，为强骨颗粒在预防及治疗骨质疏松症提供理论和实验依据。
　　 方法：
　　 1.破骨细胞制备：从刚出生的大鼠骨髓腔内进行破骨细胞的分离、纯化、鉴定和传代培养。
　　 2.载药血清制备：应用强骨颗粒高剂量 (H)、中剂量 (M)和低剂量 (L)、尼尔雌醇（E）及普通食物(N)分别喂养五组大鼠，以获得不同的药物血清及对照组血清。
　　 3.体外观察不同稀释浓度的载药血清及阴性对照组血清对破骨细胞增殖的影响（TRAP+计数法）。
　　 4.体外观察置于不同稀释浓度载药血清及阴性对照组血清里的破骨细胞对骨片吸收形成吸收陷窝的数目的影响。
　　 结果：
　　 1.通过小鼠四肢骨机械分离、纯化、传代培养，经抗酒石酸酸性磷酸酶验证为破骨细胞，且可获得较高浓度和一定数量。
　　 2.强骨颗粒高剂量组、尼尔雌醇组含药血清培养的破骨细胞细胞数明显减少，且与中、低剂量组、阴性对照组相比，存在显著性差异。中、低剂量组与阴性对照组相比，也使破骨细胞的数量减少，但不存在显著性差异。
　　 3.强骨颗粒高剂量组、尼尔雌醇组含药血清培养的破骨细胞作用骨片而形成的骨陷窝数目明显减少，且与中、低剂量组、阴性对照组相比，存在显著性差异。中、低剂量组与阴性对照组相比，也使骨陷窝数目明显减少，但不存在显著性差异。
　　 结论：强骨颗粒能明显抑制破骨细胞的增殖，降低破骨细胞骨吸收的活性，且具有剂量依赖性，这为该方能较好治疗骨质疏松症从细胞生物学方面提供了理论依据。