凋膜止崩方对大鼠子宫内膜增生症组织中MMP1和TIMP1蛋白表达的影响

摘要

研究目的：根据子宫内膜增生症雌激素依赖性原理，以雌激素负荷去势法建立大鼠子宫内膜增生症模型，研究凋膜止崩方对大鼠增生子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-1（简称MMP-1）和基质金属蛋白酶组织抑制物-1（简称TIMP-1）蛋白表达的影响，进一步探讨药物靶向治疗无排卵性功能失调性子宫出血(ADUB)的分子生物学机制，为药物的临床应用提供可靠的理论依据和实验依据。
　　 研究方法：将48只200g+20g 健康雌性SD大鼠随机分为4组：空白组(A)、模型对照组（B）、实验大剂量组（C）、实验小剂量组（D）。造模方法：A组：大鼠常规饲养，于第3天仅按照手术操作开关大鼠腹部而不摘除卵巢，术后第3天起肌肉注射高压灭菌花生油0.15ml/100g体重，隔天注射，连续14次，观察大鼠阴道涂片，于阴道涂片HE染色处于动情前期时处死。B组：大鼠常规饲养，于第3天行大鼠双侧卵巢摘除术，术后第3天起肌肉注射由高压灭菌花生油稀释的苯甲酸雌二醇0.15ml/100g 体重，隔天注射，建立子宫内膜增生过长的动物模型，连续14次后，随机取4只大鼠子宫，经病理切片电子显微镜下证实造模成功，给大鼠双侧宫腔内注射生理盐水0.3ml/侧，于宫腔注射生理盐水后第3天处死。C、D组：大鼠常规饲养，于第3天行大鼠双侧卵巢摘除术，术后第3天起肌肉注射由高压灭菌花生油稀释的苯甲酸雌二醇0.15ml/100g 体重，隔天注射，建立子宫内膜增生过长的动物模型，连续14次后，分别给C组动物双侧宫腔内注射大剂量实验用药（鸦胆子油、莪术油、元胡混合液）0.6ml（即0.3ml/侧，药物含量0.001g/侧），D组动物双侧宫腔内注射小剂量实验用药（鸦胆子油、莪术油、元胡混合液）0.6ml（即0.3ml/侧，药物含量0.0005g/侧）于宫腔注药后第3天处死。各组大鼠均于处死后取出子宫组织，-20℃保存备用。
　　 采用Western-blotting方法检测四组大鼠子宫内膜组织中MMP-1和TIMP-1蛋白的表达。探讨凋膜止崩方治疗ADUB的可能机制。
　　 研究结果：
　　 1.大鼠子宫内膜组织中TIMP-1蛋白的表达情况：模型对照组与空白组比较，子宫内膜组织中TIMP-1蛋白表达水平明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；实验大、小剂量组与模型对照组比较子宫内膜组织中TIMP-1蛋白表达水平均明显降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；实验大剂量组与实验小剂量组比较，子宫内膜组织中TIMP-1蛋白表达水平变化不大，无统计学意义(P>0.05)。
　　 2.大鼠子宫内膜组织中MMP-1蛋白的表达情况：模型对照组与空白组比较，子宫内膜组织中MMP-1蛋白表达水平明显降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；实验大、小剂量组与模型对照组比较子宫内膜组织中MMP-1蛋白表达水平均明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；实验大剂量组与实验小剂量组比较，子宫内膜组织中MMP-1蛋白表达水平变化不大，无统计学意义(P>0.05)。
　　 研究结论：
　　 1.采用雌激素负荷去势法成功建立了增生过长子宫内膜模型，但需在精确掌握麻醉剂量，严格遵循无菌操作的前提下进行，将出血、感染控制在最低程度，提高造模成活率。
　　 2.MMP-1和TIMP-1在ADUB的发生发展中起着极为重要的作用，二者蛋白表达水平的高低是影响子宫内膜增生过长关键环节之一。
　　 3.凋膜止崩方通过降低大鼠增生子宫内膜组织中TIMP-1蛋白表达，增高MMP-1蛋白表达，从而加速了子宫内膜组织中ECM的水解，导致子宫内膜崩解、脱落，达到祛除大鼠增生过长子宫内膜作用。

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文献综述

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参考文献

附录 攻读学位期间的研究成果

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