针刺干预对颅脑损伤模型大鼠血清中NSE及脑组织中TNF--α的影响

摘要

目的:通过观察颅脑损伤大鼠模型急性期和恢复期分别介入针刺治疗，其脑组织中TNF-α和血液中NSE的表达与针刺的关系，探索针刺治疗颅脑损伤的最佳治疗时间窗。 方法:选用70只SD大鼠，随机分为空白组、模型对照组（模型1组、模型2组）、针刺治疗组（针刺1组、针刺2组），使用eCCI制备TBI模型（除空白组外）。针刺1组于造模后第2天介入针刺治疗，针刺2组于第9天介入针刺治疗。取人中，双侧曲池，双侧足三里穴位，分别在脑损伤后第9日、第16日进行观察、取材、检测相关指标: (1)评价大鼠的神经功能、行走能力及平衡能力。 (2)通过HE染色的病理切片，在光镜下观察脑组织形态的改变。 (3)利用ELISA方法检测大鼠脑组织中TNF-α和血清中NSE含量的动态变化。 结果:针刺对颅脑损伤大鼠模型脑组织中TNF-α和血液中NSE的含量有影响。于打击后第9日和第16日分别观察针刺1组、模型1组、针刺2组、模型2组老鼠的神经功能、行走能力及平衡能力，结果显示针刺1组的神经功能、平衡能力和行走能力比针刺2组、模型对照组好，比空白组稍差。针刺2组的神经功能、平衡能力和行走能力比模型对照组好。 在光镜下观察脑组织的形态变化，空白组脑组织内神经细胞密集，可清楚地看到细胞的大体形态，无细胞死亡;模型组皮层神经细胞较少、神经元皱缩、胞质深染、核不清晰，有坏死神经细胞;针刺各组胶质细胞增多、凋亡小体减少、坏死细胞明显减少，神经元形态接近正常，坏死面积缩小，血液循环明显改善。 在大鼠颅脑损伤后通过ELISA方法检测其脑组织中TNF-α和血液中NSE的含量，模型组、针刺组同空白组比较均有显著性差异(P＜0.01);针刺1组和针刺2组比较有较显著的差异(P＜0.01);针刺组和模型组比较有显著性差异(P＜0.01)。 结论:针刺介入治疗在颅脑损伤后时间应尽可能早，更有利于发挥针刺对脑组织损伤的调控作用，抑制脑组织中TNF-α的释放和血清中NSE的表达。

目录

声明

摘要

中英文缩略语对照表

引言

第一部分 文献回顾

1 现代医学对颅脑损伤的认识

1．1 颅脑损伤后脑血流动力学的改变

1．2 颅脑损伤后脑组织的病理改变及Ca2对病理生理变化的影响

1．3 颅脑损伤后的炎症反应

1．4 颅脑损伤后脑组织中TNF-α及血清中NSE的变化及意义

2 中医学对颅脑损伤的认识

2．1 脑之论述

2．2 中医对颅脑损伤的认识

3 针灸对颅脑损伤治疗的概况

3．1 针刺治疗颅脑损伤机制的研究

3．2 针刺治疗颅脑损伤的临床研究

第二部分 实验研究

1 TBI大鼠模型动物制备的实验研究

1．1 实验动物

1．2 主要药品及试剂

1．3 主要仪器

2 实验方法

2．1 动物及分组

2．2 动物模型制备步骤

2．3 模型评价手段

2．4 针刺治疗方案

2．5 针刺治疗后大鼠的神经功能、平衡能力及运动能力的评价

2．6 动物取材方法及HE染色

2．7 HE染色病理切片的制作

3 结果与分析

3．1 术后大鼠生命体征与行为功能评价及分析

3．2 针刺治疗后大鼠行为功能评价及分析

3．3 光镜检测

3．4 血清中NSE表达量的检测

3．5 脑组织中TNF-α含量变化的检测

4 讨论

4．1 针刺治疗TBI腧穴的选择

4．2 实验研究的创新点

4．3 针刺对大鼠脑组织内的TNF-α的含量和血清中NSE表达量的影响

4．4 怎样在动物模型制造的过程中减少动物的死亡

4．5 本实验全部选取雌性大鼠主要有以下几个方面的原因

4．6 颅脑损伤治疗阶段的划分

5 结论

6 问题与展望

结语

参考文献

附录

致谢