p53与p21/WAF1/CIP1基因对肿瘤细胞辐射敏感性的修饰

摘要

p53基因与细胞辐射敏感性密切相关,但其机理比较复杂.诱导细胞内p53的表达可以 产生细胞凋亡或细胞周期滞两方面的结果,细胞周期蛋白激酶抑制蛋白p21/WAF1/CIP1在p53依赖的G1期阻滞中起重要的介导作用,但并不参与p53依赖的细胞凋亡.该实验通过基因转 染的方法初步探讨了p53和p21基因对肿瘤细胞辐射敏感性的影响,企图为肿瘤的放射治疗寻求一种提高敏感性的途径.实验观察到:转染p53基因,HL-60细胞对γ射线的敏感性没有变化,而PC3M-p21细胞辐射敏感性增加,说明p53对不同肿瘤细胞辐射敏感性的影响不同,p53对不同肿瘤细胞辐射敏感性的影响可能与细胞的遗传背景有关.实验表明p53和反义p21基因共转染能增加PC3M细胞的辐射敏感性,为增强某些肿瘤细胞辐射敏感性提供了新的思路.

目录

前言

第一章p53、p21/WAF1/CIP1及反义p21/WAF1/CIP1基因真核表达载体的构建

一、载体构建与鉴定图谱

二、材料和方法

三、实验结果

四、小结

第二章携带p53、p21/WAF1/CIP1或EGFP基因重组逆转录病毒包装细胞株的建立

一、材料和方法

二、实验结果

三、小结

第三章HL-60-p53细胞株的建立、辐射敏感性和化学敏感性的检测及分子机理的初步探讨

一、材料和方法

二、实验结果

(一)稳定表达野生型p53基因的细胞株HL-60-p53的建立和鉴定

(二)通过制作存活曲线比较HL-60-p53细胞与HL-60细胞的辐射敏感性

(三)p53基因转染HL-60细胞没有引起细胞辐射敏感性改变的原因的初步探讨

(四)MTT法比较HL-60-p53细胞与HL-60细胞对数种肿瘤化疗药物的化学敏感性

三、小结

第四章PC3M-p21A细胞株的建立及p53基因对其辐射敏感性的影响

一、材料和方法

二、实验结果

(一)PCR-SSCP检测PC3M细胞p53基因突变

(二)PC3M-p21A细胞株的建立

(三)重组逆转录病毒pLXSN-p53、pLXSN-LEIN感染PC3M-p21A、PC3MC细胞

三、小结

讨论

参考文献

致谢

文献综述