黑鲷（Acanthopagrus schlegeli）幼鱼对氨氮胁迫的生理响应及其维生素C的营养需求研究

摘要

本文对黑鲷幼鱼对氨氮胁迫的生理响应及其维生素C的营养需求进行了研究。主要内容如下： 1.氨氮对黑鲷稚鱼、幼鱼的急性毒性研究在水温25℃，盐度28，pH 8.1的室内养殖水体中分别对黑鲷稚鱼(1.0±0.2g)和幼鱼(30.0±2.0g)进行了氨氮的急性毒性试验，试验用NH4Cl来调节氨氮浓度，正式试验前分别对黑鲷稚鱼和幼鱼进行了毒性预试验，分别以24小时未见死亡组和全部死亡组的浓度为最小浓度和最大浓度，随后以等对数间距设计正式试验的氨氮浓度。对稚鱼的氨氮浓度设定为：0，20.0 mg/L，26.0 mg/L，33.8 mg/L，43.94 mg/L，57.12 mg/L；幼鱼的氨氮浓度为：0，30.0 mg/L，34.5 mg/L，39.7 mg/L，45.6 mg/L，52.5 mg/L。结果表明，稚鱼的24hLC50、48hLC50、72hLC50、96hLC50分别为：2.43mg/L、2.09mg/L、1.90mg/L、1.74mg/L非离子氨(NH3-N)，安全浓度为0.174mg/L NH3-N。幼鱼的24hLC50、48hLC50、72hLC50、96hLC50分别为：3.10mg/L、2.47mg/L、2.15mg/L、1.99mg/L非离子(NH3-N)，安全浓度为0.199mg/L NH3-N。结论，从氨氮对黑鲷稚鱼、幼鱼的LC50来分析，黑鲷稚鱼、幼鱼对氨氮有较高的耐受性。 2.急性氨氮胁迫对黑鲷幼鱼皮质醇、血糖及乳酸含量的影响在水温为25℃，设计了0、10、20mg/L总氨(即非离子氨为0、0.67、1.33mg/L)的三个氨氮处理，对黑鲷(体重为28.0±2.0g)进行96h的急性胁迫试验，分别于0、6、12、24、48和96h取血样，离心取血清进行测定皮质醇、血糖及乳酸水平的变化。结果显示，对照组在96h内无明显上升或下降的趋势，10mg/L和20mg/L氨氮组的皮质醇均在6h时出现最大值，分别为65.07ng/ml和70.97ng/ml，均与对照组有显著性差异(P<0.05)，其后，各氨氮处理组的皮质醇开始下降，至96h时，各氨氮组的皮质醇基本回恢复到正常水平。血清中血糖和乳酸水平跟皮质醇变化相似，胁迫情况下，血糖和乳酸也是先上升后下降的趋势。试验表明，氨氮急性胁迫造成黑鲷较强的应激反应，皮质醇在应激反应较明显，是较好的应激指标，但在氨氮浓度不高的情况下，各应激指标都会恢复到正常水平，说明，黑鲷幼鱼能够逐渐地适应其胁迫。 3.不同盐度条件下氨氮对黑鲷幼鱼生长指标的影响在水温25℃，pH8.1的条件下，设定三个盐度(20，28，36)和三个氨氮浓度(0、5、10mg/ml总氨(非离子氨为：0、0.33、0.67mg/L)，一共9组试验组，每组设三重复，对黑鲷幼鱼进行为期30d的慢性氨氮胁迫，以研究氨氮暴露对黑鲷幼鱼生长指标的影响。试验结果显示，同一盐度条件下，随着氨氮浓度的增加，黑鲷幼鱼的增重率(WGR)有下降的趁势，而黑鲷幼鱼的饲料系数也呈上升的趋势。高氨氮浓度组的WGR与低浓度组有显著性的差异。在盐度28和36的低中高三个氨氮浓度之间的WGR、SGR均无显著性差异。高盐度的10mg/ml氨氮浓度组FCR最高，为2.82，低盐度组的未添加氨氮组FCR则最小，仅为2.12。此外，各处理组对黑鲷幼鱼的体成分组成没有显著性差异(P>0.05)。结论，盐度与氨氮之间对黑鲷幼鱼生长影响的交互作用不明显。盐度对黑鲷幼鱼的增重系和特殊生长率没有显著性影响，而氨氮对黑鲷幼鱼的增重率、特殊生长率和饲料系数均有显著性影响。一般随着盐度、氨氮浓度的升高，其增重率、特殊生长率会下降，饲料系数增加。此外，两者对黑鲷幼鱼的体成分无显著性影响。 4.不同盐度条件下氨氮对黑鲷幼鱼超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性的影响在水温25℃，pH8.1的条件下，设定三个盐度(20，28，36)和三个氨氮浓度(0，5，10mg/ml总氨，换算为非离子氨为：0、0.33、0.67mg/L)，一共9组试验，每组设三重复，对黑鲷进行为期30d的慢性氨氮胁迫，分别在氨氮暴露的第0、6、12、18、24、30d取样以研究氨氮暴露对黑鲷超氧化物歧化酶(SOD)与过氧化氢酶(CAT)的影响。试验结果表明，低、中盐度条件下，10mgTAN/L组随着氨氮暴露时间的延长，其SOD活力呈先上升后下降的趋势，经过30天的氨氮暴露后，各盐度的三个氨氮组黑鲷幼鱼肝脏中的SOD、CAT活力基本恢复到暴露前水平；在整个氨氮暴露过程中，各组氨氮处理的黑鲷幼鱼的SOD活力变化没有显著性差异，同一氨氮浓度的不同暴露时间之间的SOD活力变化亦无显著性差异。CAT活力的变化情况跟SOD相似，在低盐度和中盐度组中，5mgTAM，和10mg TAN/L，的氨氮暴露胁迫，其CAT活力有先上升后下降的趋势，推测可能是低盐和中盐条件下，5mg TAN/L和10mg TAN/L的氨氮暴露促进了黑鲷幼鱼SOD和CAT酶的合成的缘故。直到黑鲷幼鱼适应后，其SOD和CAT活力就会恢复到正常水平，而高盐度组，不能引起黑鲷有胁迫的兴奋效应。结论，氨氮和盐度之间对黑鲷幼鱼的SOD和CAT活性的影响无交互作用。在低氨氮浓度范围应激下，黑鲷幼鱼肝脏SOD、CAT活性变化随着氨氮的升高而加快。可能是氨氮胁迫刺激黑鲷免疫系统的应答，从而使黑鲷幼鱼更快地适应所处的氨氮胁迫。 5.饲料中VC含量对黑鲷幼鱼生长及免疫力的影响以鱼粉和酪蛋白为蛋白源，配制7组不同剂量维生素C的饲料(维生素C含量的添加量分别为：0，50，100，200，400，800，1600mg/kg饲料)，在室内饲养黑鲷幼鱼(10.5±1.2 g)8周，对黑鲷幼鱼进行饲料维生素C需求和生长指标的研究，分析了肝脏中维生素C含量及肝脏中两种抗氧化酶活性的影响。试验结果表明，投喂8周后，添加维生素C饲料组能促进黑鲷幼鱼的增重率(WGR)，特殊生长率(SGR)及饲料系数(FCR)，与无添加组具有显著性差异(P<0.05)。8周后，200mg/kg组的黑鲷幼鱼的WGR，SGR最大，FCR最小。无添加组(对照组)的生长情况最差。肝脏中维生素C的含量随着饲料中维生素的增加而增加，最后趋于稳定，且添加维生素C的各组与无添加组有显著性差异(P<0.05)。肝脏中的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)随着饲料中的维生素C的增加而升高；未添加维生素C组的SOD活力低于其它各组，但无显著差异(P>0.05)。各组CAT活力随着饲料维生素C含量的增加有先上升后下降的趋势，但各组之间均无显著性差异(P>0.05)。结论，从本试验黑鲷幼鱼的生长情况看，在饲料中添加200mg/kg的维生素C较为适宜。

目录

声明

前言

第一章黑鲷对氨氮急性胁迫的生理响应研究

第一节氨氮对黑鲷稚鱼、幼鱼的急性毒性研究

第二节急性氨氮胁迫对黑鲷幼鱼血清皮质醇、血糖及乳酸含量的影响

第二章不同盐度条件下慢性氨氮胁迫对黑鲷幼鱼的影响

第一节不同盐度条件下氨氮对黑鲷幼鱼生长的影响

第二节不同盐度条件下氨氮对黑鲷幼鱼肝脏SOD与CAT活性的影响

第三章饲料中VC含量对黑鲷幼鱼生长及免疫力的影响

附录

参考文献

致谢