染色体17p13.3缺失区内新基因RNMTL1和Gemin4转录调控机制的初步探讨

摘要

原发性肝细胞肝癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)是最常见的人类恶性肿瘤之一,全世界每年新发生的肝癌中约有40％在中国.和其它肿瘤一样,肝癌的发生发展是一个多步骤的过程,涉及到多个相关基因结构和表达调控的改变,尤其是癌基因和抑癌基因的变化.RNMTL1基因(The human RNA methyltransferase like 1 gene,Accession No.AF177344)是我们实验室用位于17p13.3区段内PAC579插入的DNA片段为探针筛选人正常肝cDNA文库克隆到的一个新基因.Gemin4基因(The human gem associated protein 4,Accession No.NM_015721)也是位于染色体17p13.3区段内的基因.为了探讨RNMTL1基因和gemin4基因在转录水平的基本调控机制,分析该基因的转录调控与肝细胞肝癌发生发展的关系,该论文对RNMTL1基因和gemin4基因的转录调控进行了以下的研究.在对RNMTL1基因的转录调控机制的研究中,我们发现:位于RNMTL1基因转录起始位点上游-38到-31区域的顺式作用元件ATF/CREB及其与之结合的转录因子对于RNMTL1基因启动子的活性具有关键性的作用.在对gemin4基因的转录调控机制的研究中,我们发现:(1)gemin4基因在肝癌组织中表达,而在对应的癌旁组织和正常肝组织中不表达;(2)gemin4基因转录起始点位于翻译起始密码子(ATG)上游-132处;(3)在肝癌细胞株SMMC7721和BEL7402中,gemin4最小启动子片段为99bp(-242~-143),而在骨肉瘤细胞株U2OS中,gemin4最小启动子片段为125bp(-242~-117);(4)gemin4最小启动子片段中存在一系列转录因子(AP-2,SP1,NRF1和NF-Kb/Est1等)识别的顺式调控元件,在gemin4基因的转录过程中起着关键性的作用.

目录

第一部分RNMTLl基因启动子序列的确定和转录调控机制研究

前言

第一节 RNMTLl基因启动子的克隆和转录起始位点的确定

材料和方法

结果

讨论

小结

第二节RNMTLl最小启动子片段的确定及转录调控关键元件分析

材料和方法

结果

讨论

小结

第三节 RNMTLl基因转录调控机制的初步研究

材料和方法

结果

讨论

小结

第二部分Gemin4基因启动子的克隆及转录调控机制的研究

前言

材料和方法

结果

讨论

小结

参考文献

综 述CREB/ATF家族转录因子与基因表达调控

附 录硕士在读期间发表论文及获奖情况

致 谢

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