高复发膀胱移行细胞癌染色体基因组非平衡性的研究

摘要

本研究选择我院泌尿外科1996年1月～2003年8月的膀胱癌住院患者石蜡包埋标本，经随访、筛选，分为高复发组和无复发组。应用比较基因组杂交技术对每例标本进行检测，经过统计分析，得出高复发组膀胱癌染色体畸变的区段或位点。然后在这些区段或位点上选择适当的微卫星DNA位点，进行PCR扩增，电泳后得出微卫星变异的确定信息。复旦大学肝癌研究所曾经在研究不同转移潜能人肝癌细胞模型中，建立过比较基因组杂交技术的平台。我们应用的是间接法CGH技术，这种方法，步骤很多，操作繁琐，但是灵敏度高，背景低，对于石蜡包埋组织不能用直接法标记进行杂交。对于间接法CGH，尤其是利用石蜡包埋组织进行CGH，国内文献没有相关的报道，国外文献报道的也不多，所以很多实验条件需要进一步摸索。我们改进了石蜡组织提取基因组DNA的方法，提高了产量和纯度。同时，我们应用DNA酶酶切配合广泛标记系统(ULS)进行标记探针，并按1：1的量与缺口平移法标记的探针进行对比实验，以调整探针的量。我们采用了基于多聚酶链反应(PCR)的方法对石蜡包埋组织DNA进行微卫星分析，并应用毛细管电泳、配合相关分析软件来分析各个位点的变异情况，最终得出染色体畸变的大致位置，为今后的全基因组扫描、寻找“膀胱癌复发相关基因”做前期工作。

目录

前言

第一部分高复发膀胱移行细胞癌的比较基因组杂交研究

摘要

前言

材料和方法

结果

讨论

小结

参考文献

第二部分高复发膀胱移行细胞癌的微卫星分析

摘要

前言

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

全文总结与创新之处

附件

后记

上海市科技发展基金项目合同

综述：膀胱癌复发与染色体畸变关系的研究进展

论文独创性声明及使用授权声明