解偶联蛋白2基因多态性与腹膜透析患者代谢紊乱的相关性研究

摘要

背景：
　　腹膜透析作为终末期肾病的肾脏替代治疗方法之一，因其血流动力学稳定及能够居家治疗的优势，被越来越多的患者接受。然而临床中我们观察到腹膜透析患者相当一部份人存在胰岛素抵抗、血脂异常、肥胖等代谢紊乱，并且有些患者是多项代谢紊乱同时存在。每一项都会增加心血管疾病的危险性，且诸多危险因素集聚于一体，其协同作用远远大于各危险因素单独作用之和。这成为腹透患者发生心血管事件的危险因素之一。而心血管事件是导致腹透患者死亡的首要原因之一。
　　目前认为额外的葡萄糖吸收是腹透患者代谢紊乱最重要的原因之一。虽然每个腹透患者每天都要从腹透液中吸收大量的葡萄糖，但并非所有人都发生代谢紊乱。除了不可避免的葡萄糖负荷增加这个外因以外，患者自身的遗传素质也一定程度决定了患者是否容易出现肥胖、胰岛素抵抗等代谢并发症。解偶联蛋白(UCP)是近年来发现的离子通道蛋白，它能使呼吸链与ATP产生过程解偶联，导致能量以热的形式消耗，并参与许多病理生理过程。UCP2是解偶联蛋白家族中的一员，其病理生理特点与机体物质能量代谢密切相关。UCP2基因变异可能使机体能量消耗产生差异，影响体脂的含量及分布。UCP2的表达水平与氧化应激、胰岛素分泌水平有关。该基因可能是将肥胖、胰岛β细胞功能障碍和2型糖尿病等联系起来的关键基因。
　　目的：
　　通过分析腹透患者UCP2基因第8号外显子3’-非编码区45bp插入(Ⅰ)/缺失(D)、启动子-866G/A、第4号外显子Ala55Val的多态性，比较不同基因多态性的患者在肥胖、胰岛素抵抗、血脂、脂质因子等代谢方面情况，探讨该基因多态性对腹透患者代谢紊乱的可能影响。
　　方法：
　　入选华山医院腹膜透析中心正规随访的透析龄大于6个月的维持性腹透患者116例，提取全血基因组DNA，经PCR扩增后检测患者UCP2基因第8号外显子3’非编码区45bp插入(Ⅰ)/缺失(D)、启动子-866G/A、第4号外显子Ala55Val的多态性。根据基因位点多态性，将患者分组，比较不同组患者的人体测量学(BMI、肱三头肌皮脂厚度、腹围)、胰岛素抵抗、血脂水平、炎症反应、脂肪因子水平、腹膜葡萄糖吸收量等方面的差异。
　　1.在中心正规随访的腹透患者均在空腹状态下测量身高、体重、计算体重指数BMI=体重(kg)/身高2(m2)；测量腹围及肱三头肌皮脂厚度(TSF)。
　　2.胰岛素抵抗用HOMA-IR评定，HOMA-IR=空腹血糖(mmol/L)×空腹血清胰岛素(μ m/mL)/22.5。
　　3.测定空腹血脂(CRO、TG、HDL-C、LDL-C等)、铁蛋白、C反应蛋白(CRP)；双抗体夹心ABC-ELISA法测定人脂联素(adiponectin)、瘦素(leptin)及抵抗素(resistin)。
　　4.行透析充分性评估及腹膜平衡试验，计算Kt/V、Ccr、D/P及24小时腹膜葡萄糖吸收量。
　　结果：
　　1.入选了116例腹透患者，男性60例，女性56例，平均年龄62.6638±14.9695岁，中位数透析龄12±12月。
　　2.根据UCP2基因第8号外显子3’非编码区45bp插入/缺失位点多态性分组，插入/插入型为Ⅱ组，缺失/缺失型为DD组，缺失/插入型为DI组。将DI与Ⅱ组患者合并成一组与DD型患者比较：DD组患者比DI/Ⅱ组患者甘油三脂水平高(2vs1.48，P<0.05)，且IR明显升高(3.12vs2.3778，P<0.01)，其余各项指标不存在显著性差异。
　　Logistic回归分析显示：DD组患者与DI/Ⅱ组相比，发生甘油三脂及胰岛素抵抗水平升高的风险无差异。
　　3.根据UCP2基因启动子-866位点多态性分组，野生型为GG组，突变纯合子与突变杂合子为AA/AG组。GG组患者比AA/AG组患者甘油三脂水平高(2.47vs1.52，P<0.05)。
　　Logistic回归分析显示：GG组患者甘油三脂升高的风险是AA/AC组的2.72倍，P<0.01。即使矫正了腹透液葡萄糖吸收对甘油三脂水平的影响仍有意义，OR=2.441，P=0.031。
　　4.根据第4号外显子Ala55Val的多态性分组，野生型纳入AA组，突变纯合子与突变杂合子纳入AA/AV组。VV组患者比AA/AV组患者TG明显升高(2.06vs1.47，P<0.01)，腹透液葡萄糖吸收量明显增多(96.734vs82.6881，P<0.01)，IR(3.0933vs2.6027，P<0.05)、铁蛋白(226.5vs221，P<0.05)升高，脂联素降低(9.66vs14.39，P<0.05)。
　　Logistic回归分析显示：VV组患者甘油三脂升高的风险是AA/AV组的2.745倍，P=0.01。即便对腹透液葡萄糖吸收的影响进行矫正后仍有意义，OR=2.441，P=0.03。
　　5.将DDGGVV型患者定义为劣势基因组，不含或只含一种劣势基因纯合子的患者纳入优势基因组。优势基因组患者45例中2例发生新发糖尿病，劣势基因组27例中有6例，二者有统计学差异(P=0.02)。他汀类药物的服用率优势基因组为33.3％，劣势基因组为59.3％，二者有差异(P=0.031)。
　　劣势基因组患者比优势基因组患者IR明显增大(3.9271vs2.432，P<0.01)，TG明显升高(2.68vs1.4，P<0.01)，葡萄糖吸收量明显增多(108.9939vs83.6698，P<0.01)，CHO(5.3641vs4.6527，P<0.05)、CRP(5.77vs1.72，P<0.05)、铁蛋白(270vs209，P<0.05)、瘦素(2.8583vs2.0542，P<0.05)升高。
　　Logistic回归分析显示：劣势基因组胰岛素抵抗的风险是优势基因组的3.75倍，P=0.01，即使修正了腹透液葡萄糖吸收量的影响后其风险仍有统计学意义，OR=3.084，P=0.031。劣势基因组甘油三脂升高的可能是优势基因组的6.562倍，P=0.001，即使校正了腹透液葡萄糖吸收量的影响后其风险仍有显著意义，OR=5.97，P=0.002。
　　结论：
　　UCP2基因第8号外显子3’-非编码区45bp插入(I)/缺失(D)、启动子-866G/A、第4号外显子Ala55Val多态性与腹透患者代谢紊乱之间存在一定的相关性。DD型、GG型、VV型患者在葡萄糖负荷增加的情况下更易发生代谢紊乱，出现胰岛素抵抗、脂代谢异常。DDGGVV型的患者代谢紊乱的表现更加明显，发生胰岛素抵抗、高甘油三酯的风险更高。