吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)在子宫内膜异位症的表达以及功能研究

摘要

目的：通过体外实验，观察子宫内膜异位症患者的在位内膜和异位内膜中IDO mRhA表达水平及其与COX-2、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2 mRNA表达水平的相关性，初步探讨IDO在子宫内膜异位症形成机制中的调节功能。
　　材料与方法：收集子宫内膜异位症患者(主要是卵巢内膜样囊肿患者)的异位病灶42例及在位分泌期内膜28例；收集确诊未患有EMT而因其他原因手术或刮宫的患者子宫分泌期内膜22例作为对照组；用RT-PCR方法测定IDO、COX-2、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2在正常内膜、在位内膜和异位病灶中的mRNA表达，运用Image J凝胶电泳分析软件检测上述因子mRNA表达水平。
　　结果：
　　1.IDO mRNA在人正常子宫内膜、EMT在位内膜和异位病灶中均有表达；对照组IDO mRNA表达水平显著低于EMT在位内膜及异位内膜(P<0.05)，且EMT在位内膜IDO mRNA表达水平显著低于异位内膜(P<0.05)。且IDOmRNA在重型EMT内膜(n=37)中的表达显著高于轻型EMT内膜(n=43)(P<0.05)。
　　2.曾用孕三烯酮治疗的EMT患者组异位内膜IDO mRNA表达水平显著低于未治疗EMT患者组异位内膜(P<0.05)。
　　3.COX-2 mRNA在对照组内膜、EMT在位内膜、异位内膜中表达水平依次升高，两两比较均有显著性差异(P<0.05)。
　　4.在位内膜IDO mRNA表达水平与在位内膜COX-2及MMP-2 mRNA表达水平呈正线性相关；异位内膜IDO表达水平与异位内膜COX-2及MMP-2 mRNA表达水平亦呈正线性相关。在位内膜及异位内膜中IDO mRNA表达水平与MMP-9 mRNA均无明显线性相关。
　　5.对照组内膜MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2 mRNA表达水平均显著低于EMT患者在位内膜及异位内膜(P<0.05)。在位内膜与异位内膜中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2 mRNA表达水平无显著性差异。异位内膜中MMP-2/TIMP-2比值显著高于在位内膜(P<0.05)。
　　结论：
　　1.EMT在位及异位内膜中，MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2 mRNA表达水平高于对照组。其中异位内膜MMP-2/TIMP-2比值高于在位内膜，提示异位内膜中MMP-2活性增强，可能导致异位内膜侵蚀性增强。该结果与文献相关研究报道相一致。
　　2.IDO mRNA在EMT在位及异位内膜中表达水平均显著高于对照组，并且与EMT在位及异位内膜中COX-2及MMP-2 mRNA表达水平均呈正线性相关，但与MMP-9无明显线性相关；此外，IDO mRNA在EMT异位内膜上表达水平显著高于在位内膜，且IDO mRNA在重型EMT内膜中的表达显著高于轻型EMT内膜，提示异位内膜组织中的IDO转录增强可能通过诱导COX-2活性促进PGE2合成分泌，由此诱导MMP-2活性增强，从而参与EMT病灶形成中内膜粘附及侵蚀等生物学过程，亦有可能参与EMT病情进展。
　　3.曾使用孕三烯酮治疗的EMT患者异位内膜IDO基因mRNA表达显著低于未治疗EMT患者异位内膜，提示孕三烯酮用于治疗EMT的机制可能与下调IDO表达，从而降低异位内膜侵蚀性有关。这为解析孕三烯酮的药理机制以及以IDO作为分子靶点的新药开发与研究奠定了初步的理论基础与实验依据。