摘要
第一章 绪论
1.1 组织工程支架
1.1.1 主要的组织工程材料类型
1.1.2 组织工程多孔支架的制备方法
1.1.3 PLGA多孔支架的性能
1.1.4 组织工程支架的表面修饰
1.2 材料表面拓扑形貌的细胞响应行为
1.2.1 纳米尺度拓扑形貌
1.2.2 微米尺度拓扑形貌
1.3 组织工程双层支架用于修复骨/软骨缺损
1.4 课题的提出
参考文献
第二章 微米拓扑形貌的尺寸对骨髓基质干细胞的响应行为的影响
2.1 前言
2.2 实验部分
2.2.1 原料与试剂
2.2.2 PLGA微米拓扑阵列的制备
2.2.3 PLGA膜的表征
2.2.4 细胞的分离和培养
2.2.5 细胞的肌动蛋白、纽蛋白和细胞核荧光染色
2.2.6 骨髓基质干细胞的成骨分化
2.2.7 MTT表征细胞活力
2.3 结果与讨论
2.4 本章小结
参考文献
第三章 利用微柱阵列控制骨髓基质干细胞的细胞核形状
3.1 前言
3.2 实验部分
3.2.1 原料与试剂
3.2.2 PLGA微柱阵列的制备
3.2.3 PLGA膜的表征
3.2.4 细胞的分离和培养
3.2.5 细胞骨架和细胞核荧光染色
3.2.6 骨髓基质干细胞的成骨分化
3.2.7 MTT表征细胞活力
3.2.8 细胞核形状的定量表征
3.3 结果与讨论
3.3.1 骨髓基质干细胞核变形现象的发现
3.3.2 骨髓基质干细胞核形状的控制
3.3.3 核变形的普适性与细胞种类依赖性
3.4 本章小结
参考文献
第四章 组织工程三维多孔支架孔表面微米拓扑形貌的构建
4.1 前言
4.2 实验部分
4.2.1 原料与试剂
4.2.2 带微米拓扑形貌的石蜡球致孔剂的制备
4.2.3 三维多孔支架的制备与表征
4.2.4 骨髓基质干细胞的分离和培养
4.2.5 MTT表征细胞活力
4.2.6 骨髓基质干细胞的成骨分化
4.2.7 多孔支架中细胞数量的测量
4.2.8 碱性磷酸酶的定量测定
4.2.9 统计分析
4.3 结果与讨论
4.3.1 表面带有微米凹坑的石蜡球致孔剂的制备
4.3.2 孔表面带有微米凸起的组织工程三维多孔支架的制备
4.3.3 三维多孔支架孔表面细胞的黏附和增殖
4.3.4 三维多孔支架孔表面干细胞的成骨分化
4.4 本章小结
参考文献
第五章 新型支架致孔剂“糖粘盐’’粒子的制备与相应三维多孔支架的研究
5.1 前言
5.2 实验部分
5.2.1 原料与试剂
5.2.2 “糖粘盐”致孔剂的制备
5.2.3 三维多孔支架的制备与表征
5.2.4 骨髓基质干细胞的分离和培养
5.2.5 MTT表征细胞活力
5.2.6 骨髓基质干细胞的成骨分化
5.2.7 多孔支架中细胞数量的测量
5.2.8 碱性磷酸酶的定量测定
5.2.9 统计分析
5.3 结果与讨论
5.3.1 “糖粘盐”致孔剂的制备
5.3.2 用“糖粘盐”致孔剂制备三维多孔支架
5.3.3 三维多孔支架中骨髓基质干细胞的行为
5.4 本章小结
参考文献
第六章 PLGA支架材料生物相容性及降解行为研究
6.1 前言
6.2 实验部分
6.2.1 原料与试剂
6.2.2 实验动物
6.2.3 新西兰兔骨髓基质干细胞的获取
6.2.4 PLGA支架的制备
6.2.5 PLGA支架与细胞复合体的构建与表征
6.2.6 PLGA支架载细胞的动态观察
6.2.7 PLGA浸提液的细胞毒性
6.2.8 PLGA浸提液血液相容性
6.2.9 PLGA支架体内植入与降解
6.2.10 PLGA支架中山羊BMSC与平面培养的肋软骨细胞共培养体外诱导向成软骨分化
6.3 结果与讨论
6.3.1 PLGA支架与细胞复合体的构建
6.3.2 培养于PLGA支架中的细胞的动态观察
6.3.3 PLGA支架材料浸提液的细胞毒性
6.3.4 PLGA浸提液的血液相容性
6.3.5 PLGA支架材料的体内植入与降解
6.3.6 PLGA支架材料中山羊BMSC与平面培养的肋软骨细胞共培养体外诱导向成软骨分化
6.4 本章小结
参考文献
第七章 不同孔隙率分布双层支架修复兔关节软骨/软骨下骨缺损
7.1 前言
7.2 实验部分
7.2.1 原料与试剂
7.2.2 PLGA双层支架的制各
7.2.3 PLGA双层支架力学性能的测试
7.2.4 实验动物
7.2.5 骨髓基质干细胞的分离、培养与传代
7.2.6 细胞示踪标记
7.2.7 体外接种细胞及其电镜表征
7.2.8 动物模型制备
7.2.9 取材及组织学观察
7.2.10 Real-time PCR检测相关基因表达
7.3 结果与讨论
7.3.1 PLGA双层支架的制备
7.3.2 PLGA双层支架的力学性能
7.3.3 PLGA双层支架植入骨/软骨缺损
7.3.4 组织学/免疫组织学检测和评分
7.3.5 相关基因的表达
7.4 本章小结
参考文献
第八章 不同孔径分布双层支架修复兔关节软骨/软骨下骨缺损
8.1 前言
8.2 实验部分
8.2.1 原料与试剂
8.2.2 PLGA双层支架的制备
8.2.3 动物实验
8.3 结果与讨论
8.3.1 PLGA双层支架的制备
8.3.2 PLGA双层支架植入骨/软骨缺损
8.3.3 骨/软骨缺损修复大体观和断面观察
8.3.4 组织学检查
8.3.5 相关基因的表达
8.4 本章小结
参考文献
第九章 全文总结
9.1 论文的主要工作
9.2 论文工作的主要创新性
9.3 论文的理论和实际意义
9.4 论文的不足与展望
作者简历
致谢
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