晚期结直肠癌一线化疗的临床疗效预后分析及疗效相关microRNA的初步筛选

摘要

第一部分晚期结直肠癌一线化疗的临床疗效及预后分析
　　目的:对接受一线化疗的晚期结直肠癌(colorectal cancer，CRC)患者的临床资料进行分析，探讨相关临床因素与一线化疗疗效及预后的关系。
　　方法:共收集自2009年1月至2013年5月接受规范的FOLFOX/XELOX及FOLFIRI一线化疗的210例晚期CRC患者，对其临床资料进行回顾性分析，采集的临床因素包括年龄、性别、原发灶部位、转移时相、原发灶是否根治切除、转移脏器数目及一线方案，密切随访患者的疗效评价、疾病进展时间及死亡时间。统计分析采取SPSS19.0软件进行。对无进展生存时间(progression-freesurvival，PFS)和总生存时间(overall survival，OS)单因素分析采用Kaplan-Meier曲线，并使用Log-rank检验分析其差异性，多因素分析采用COX回归模型;对近期有效率单因素分析采用卡方检验或Fisher确切概率法，多因素分析采用Logistic回归模型。经双侧检验，P＜0.05认为差异有统计学意义。
　　结果:210例患者中，中位PFS为8.1个月（95％CI:7.31～8.89个月），中位OS为25.3个月(95％CI∶22.08～28.53个月)，近期有效率为32.4％。125例(59.0％)一线行FOLFOX/XELOX化疗，85例(41.0％)一线行FOLFIRI化疗。多因素分析显示，原发灶是否根治切除(P=0.022)和转移脏器的数目(P=0.010)是影响PFS的独立因素。对OS进行多因素分析发现，原发灶是否根治切除(P=0.000)、转移脏器的数目(P=0.001)也是影响OS的独立预后因素。单因素分析显示，各变量与近期有效率的关系均无统计学差异。对170例原发灶接受根治切除的患者进行分层分析，多因素分析发现转移脏器的数目是影响PFS的独立因素(P=0.039)。对不同化疗方案进行分析，在125例接受FOLFOX/XELOX化疗的患者中，单因素分析显示原发灶是否根治切除对PFS的影响具有统计学意义(P=0.018)，多因素分析各变量与PFS的关系均无统计学差异。对于近期有效率的多因素分析发现不同性别患者接受FOLFOX/XELOX方案化疗的近期有效率存在差异(P=0.022)。在85例接受FOLFIRI化疗的患者中，转移脏器数目对PFS的影响在多因素分析中具有统计学意义(P=0.003)。
　　结论:一线选择FOLFOX/XELOX方案与FOLFIRI方案疗效相当。原发灶是否根治切除、转移脏器的数目是影响一线化疗PFS及OS的独立因素。转移脏器的数目是影响一线FOLFIRI方案PFS的独立因素。
　　第二部分晚期结直肠癌一线化疗疗效相关microRNA的初步筛选
　　目的:对一线化疗疗效差异大的晚期结直肠癌(colorectal cancer，CRC)患者，利用microRNA(miRNA)芯片及RT-PCR方法检测晚期CRC一线化疗疗效相关的差异表达miRNA，为晚期患者一线化疗方案的决策提供可供选择的目标miRNA。
　　方法:(1)在接受规范FOLFOX/XELOX及FOLFIRI一线化疗且留有化疗前血标本的晚期CRC患者中，经过配对，挑选出行FOLFOX/XELOX化疗疗效(PFS为判定标准)差异的患者6例，其中PFS长的患者3例，PFS短的患者3例;行FOLFIRI化疗疗效差异的患者10例，其中PFS长的患者5例，PFS短的5例。以上样本行miRNA芯片检测。根据芯片检测结果筛选出不同疗效患者中表达差异的miRNA。(2)经过配对，挑选出行FOLFOX/XELOX化疗疗效差异的患者20例，其中PFS长的患者10例，PFS短的患者10例;行FOLFIRI化疗疗效差异的患者20例，其中PFS长的患者10例，PFS短的10例。在以上样本中对芯片筛选的差异miRNA进行RT-PCR验证。
　　结果:(1)基因芯片筛选出疗效差异的患者中差异表达的miRNA。以表达水平相差2倍为阈值，比较PFS长和PFS短组miRNA表达的结果:在接受FOLFOX/XELOX化疗的3对配对样本中，发现表达差异的miRNA共有25个，其中低表达的miRNA有15个，高表达的miRNA有10个;在接受FOLFIRI化疗的5对配对样本中，发现表达差异的miRNA共有30个，其中低表达的miRNA有21个，高表达的miRNA有9个。(2) RT-PCR方法验证基因筛选的miRNA，以表达水平相差2倍为阈值，在接受FOLFOX/XELOX化疗的10对配对样本中，发现表达差异的miRNA共有6个，其中低表达的miRNA有4个，高表达的miRNA有2个。在接受FOLFIRI化疗的10对配对样本中，发现表达差异的miRNA共有4个，其中低表达的miRNA有3个，高表达的miRNA有1个。
　　结论:芯片筛选及PCR验证的方法可用于寻找差异表达的miRNA。接受一线化疗的晚期CRC患者循环血中存在疗效相关的差异表达miRNA。

目录

声明

主要缩略词表

摘要

第一部分 晚期结直肠癌一线化疗的临床疗效及预后分析

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

第二部分 晚期结直肠癌一线化疗疗效相关microRNA的初步筛选

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述 MicroRNA与结直肠癌化疗关系的研究进展

发表及拟发表的论文

致谢