分枝杆菌DNA的多重聚合酶链反应检测研究

摘要

第一部分应用多重聚合酶链反应法检测并鉴别临床标本中的结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌DNA.目的:为了提高聚合酶链反应(PCR)方法检测分枝杆菌DNA的特异性和敏感性、能够同时检测并鉴别结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌DNA.方法应用三对具有特异性的寡核苷酸引物,进行多重PCR扩增.这三对引物分别对应于分枝杆菌65KDa表面抗原、结核分枝杆菌插入序列IS6110及人类β珠蛋白基因的部分序列,其扩增产物分别为383bp、123bp和268bp.结论:此种多重PCR方法可以同时检测并鉴别结核分枝杆菌及非结核分枝杆菌DNA(猿猴分枝杆菌除外),具有高度的特异性和敏感性,是结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌感染的早期诊断与鉴别诊断的一种有价值的检测手段.第二部分应用多重PCR方法检测石蜡包埋组织标本中的分枝杆菌DNA.目的:应用多重PCR方法检测并鉴别石蜡包埋组织中的结核分枝杆菌复合体与非结核分枝杆菌DNA扩增片段类型,为结核分枝杆菌复合体感染与非结核分枝杆菌感染的病理学诊断提供一种补充的鉴别诊断方法.方法应用三对具有特异性的寡核苷酸引物,进行多重PCR扩增.这三对引物分别对应于分枝杆菌65KDa表面抗原、结核分枝杆菌插入序列IS6110及人类β-珠蛋白基因的部分序列,其扩增产物分别为383bp、 123bp和268bp.结论:此种多重PCR方法可以同时检测并鉴别结核分枝杆菌复合体及非结核分枝杆菌DNA(猿猴分枝杆菌除外),具有高度的特异性和敏感性.

目录

缩略词表

前 言

第一部分应用多重聚合酶链反应法检测并鉴别临床标本中的结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌DNA

一、主要仪器、试剂和材料

二、实验方法和步骤

三、结果

小结

第二部分应用多重PCR方法检测石蜡包埋组织标本中的分枝杆菌DNA

一、主要仪器和试剂

二、实验方法和步骤

三、结果

讨 论

结 论

参考文献

致 谢

综述分枝杆菌的分子生物学检测研究进展及其临床意义

参考文献

研究生在读期间发表的论文