脂质体介导胶质细胞生长因子基因体内转染对大鼠脊髓损伤修复作用的实验研究

摘要

该研究探讨胶质细胞生长因子(GGF)在急性脊髓损伤(SCI)的潜在作用。采用改良Allen法建立大鼠胸段脊髓损伤模型，采用RTPCR方法检测大鼠脊髓损伤后GGFmRNA表达的时序变化。构建含大鼠GGF2cDNA的重组质粒pEGFP-N1-GGF2和pIRES2-EGFP-GGF2，利用阳离子脂质体介导重组质粒pEGFP-N1-GGF2和pIRES2-EGFP-GGF2转染大鼠脊髓，观察GGF2在大鼠脊髓中的表达及其对大鼠脊髓损伤后神经功能恢复的影响作用。 结果表明，大鼠脊髓损伤后早期GGFmRNA表达持续降低；脂质体介导重组质粒能在体内成功转染大鼠脊髓并表达GGF2，对大鼠脊髓损伤后的神经功能恢复起促进作用。 结论 大鼠脊髓损伤后GGF表达的降低可能与脊髓损伤后少突胶质细胞大量死亡或凋亡有关，与SCI后轴突再生、髓鞘再生困难有关。GGF2基因脊髓内转染能促进大鼠脊髓损伤后神经功能的恢复，其可能机制为GGF2促进损伤脊髓内少突胶质细胞前体细胞及少突胶质细胞的增殖与存活，促进脱髓鞘轴突的重新髓鞘化和轴突的再生。

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前言

第一部分大鼠胚胎脊髓、正常脊髓内胶质细胞生长因子的表达及其在大鼠脊髓损伤后表达的时序变化

1材料

2方法

3结果

4讨论

5结论

6参考文献

第二部分重组pEGFP-N1-GGF2和pIRES2-EGFP-GGF2绿色荧光真核表达载体的构建及制备

1材料

2方法

3结果

4讨论

5结论

6参考文献

第三部分脂质体介导pEGFP-N1-GGF2和pIRES2EGFP-GGF2重组真核表达载体在脊髓内表达

1材料

2方法

3结果

4讨论

5结论

6参考文献

第四部分脂质体介导胶质细胞生长因子基因体内转染对大鼠脊髓损伤后神经功能的影响

1材料

2方法

3结果

3.1病理学结果

3.1病理学结果3.1.1HE及固绿髓鞘染色结果

3.1病理学结果3.1.2MBP抗体免疫组化染色结果与图像分析

3.1病理学结果3.1.3NF200抗体免疫组化染色结果与图像分析

3.1病理学结果3.1.4GFAP抗体免免组化染色结果与图像分析

3.2斜板试验评分

3.3脊髓损伤后大鼠BBB评分

4讨论

5结论

6参考文献

Neuregulin（GGF）/ErbB信号传导通路在神经系统中的作用

在读期间的主要学术活动

致谢