鸡屎藤(Paederia scandens)活性物质和镇痛药理活性研究

摘要

鸡屎藤Paederia scandens(Lour．)Merri．是茜草科Rubiaceae鸡屎藤属Paederia的一种攀援性藤本植物，又名“鸡矢藤”，广泛分布于中国、日本、印度、菲律宾以及美国西海岸等国家。在东南亚一些国家，鸡屎藤作为民间传统草药和食物已有数千年的悠久历史。鸡屎藤的叶子在越南曾一度作为各种食物的调味品。 近年来，曾有许多报道，从植物鸡屎藤根、茎的甲醇提取物中陆续分离出鸡屎藤苷，车叶草苷，鸡屎藤苷酸，去乙酰车叶草苷，鸡屎藤次苷等环烯醚萜苷类和环烯醚萜苷二聚体类化合物。这些化学成分具有多种生物活性：如抗病毒、抗肿瘤、抗炎和抗微生物等。在中国、日本、越南和其他的一些东南亚国家，植物鸡屎藤的根、茎、藤皮、果实作为民间草药使用已有数千年的历史，尤其在治疗牙痛、胸痛、痔疮引发的疼痛，风湿性关节炎、脾脏炎症、杆菌性痢疾等方面具有显著的疗效。虽然植物鸡屎藤具有显著的镇痛疗效而在民间广为使用，但是目前关于该植物的镇痛药理活性物质基础以及镇痛作用机制的研究文献尚未报道。 基于以上调研，我们对植物鸡屎藤全株进行了甲醇提取，并对其醇提物应用石油醚、氯仿、正丁醇进行了分步骤萃取；同时首次应用镇痛药理方法学对其总提物以及各个萃取部位进行了镇痛药理活性研究。 植物鸡屎藤的甲醇提取物以口服的方式给受试小鼠给药，应用化学刺激和热刺激引发疼痛的动物模型对其镇痛药理活性进行研究。结果表明，口服给药剂量为600mg/kg和900 mg/kg植物鸡屎藤甲醇提取物的受试小鼠在小鼠醋酸扭体实验、小鼠福尔马林实验和小鼠热水甩尾实验中对化学和热刺激引发的疼痛具有显著的耐受。另外，在小鼠福尔马林实验中植物鸡屎藤甲醇提取物表现出了中枢和外周双重镇痛机制。 应用化学刺激和热刺激引发小鼠疼痛的整体动物模型对植物鸡屎藤甲醇提取物正丁醇部位浸膏的镇痛药理活性进行研究。实验结果表明：口服给药剂量为150mg/kg，300 mg/kg和600 mg/kg植物鸡屎藤甲醇提取物正丁醇部位浸膏的受试小鼠对腹腔注射醋酸溶液、足底皮下注射福尔马林溶液和辣椒素溶液引发的疼痛以及在小鼠热水甩尾实验和小鼠热板实验中对热刺激引发的疼痛均具有耐受性。其中剂量为600 mg/kg的正丁醇部位浸膏对化学和热刺激引发的疼痛具有极其显著的抑制作用。在小鼠戊巴比妥钠延长睡眠时间实验和小鼠开野实验中，正丁醇部位浸膏未能延长小鼠戊巴比妥钠引发的睡眠时间和影响受试小鼠的自主活动行为，这些结果表明正丁醇部位浸膏的镇痛活性与催眠作用和破坏脑部运动神经的毒性作用无关，具有特异性。另外，在小鼠福尔马林镇痛药理拮抗实验和小鼠辣椒素镇痛药理拮抗实验中，此镇痛药理活性对药理拮抗工具药纳络酮和格林本脲的拮抗作用不敏感，而完全被尼莫地平的拮抗作用拮抗；表明了正丁醇部位浸膏的镇痛药理活性与L-type Ca2+ channels有关。另外，从植物鸡屎藤正丁醇部位分离出多个环烯醚萜苷类和环烯醚萜苷二聚体类化合物，正丁醇部位的镇痛药理活性可能与这些化合物的协同作用有关；至于，在这些化合物中某个化合物是否具有强烈的镇痛药理活性还需进一步深入研究。 应用化学刺激和热刺激引发小鼠疼痛的整体动物模型对植物鸡屎藤甲醇提取物石油醚部位浸膏的镇痛药理活性进行研究。实验结果表明：口服给药剂量为20 mg/kg，40 mp/kg和80 mg/kg植物鸡屎藤甲醇提取物石油醚部位浸膏的受试小鼠对腹腔注射醋酸溶液、足底皮下注射福尔马林溶液和辣椒素溶液引发的疼痛以及在小鼠热水甩尾实验和小鼠热板实验中对热刺激引发的疼痛均具有良好的耐受性。其中剂量为80mg/kg的石油醚部位浸膏对化学和热刺激引发的疼痛具有极其显著的抑制作用。在小鼠戊巴比妥钠延长睡眠时间实验和小鼠开野实验中，石油醚部位浸膏未能延长小鼠戊巴比妥钠引发的睡眠时间和影响受试小鼠的自主活动行为，这些结果表明石油醚部位浸膏的镇痛活性与催眠作用和破坏脑部运动神经的毒性作用无关，具有特异性。另外，在小鼠福尔马林镇痛药理拮抗实验和小鼠辣椒素镇痛药理拮抗实验中，此镇痛药理活性对药理拮抗工具药纳络酮的拮抗作用不敏感，而完全被格林本脲的拮抗作用拮抗；表明了石油醚部位浸膏的镇痛药理活性与K+-ATP channels有关。另外，通过应用GC-MS技术对石油醚部位化学成分进行分析发现其主要化合物为linoleic acid，thesterols和vitamin E。因此，我们推断石油醚部位镇痛药理活性与这些化合物的协同作用有关。 对从植物鸡屎藤醇提物正丁醇部位浸膏中分离出的环烯醚萜苷类和环烯醚萜苷二聚体类化合物，进行了镇痛药理动物模型筛选。结果发现，化合物鸡屎藤苷酸甲酯具有潜在的镇痛药理活性。应用化学刺激和热刺激引发小鼠疼痛的整体动物模型对该单体化合物的镇痛药理活性进行了深入研究。实验结果表明：腹腔注射给药剂量为20 mg/kg，40 mg/kg和60 mg/kg鸡屎藤苷酸甲酯的受试小鼠对腹腔注射醋酸溶液，足底皮下注射福尔马林溶液和辣椒素溶液引发的疼痛以及在小鼠热水甩尾实验和小鼠热板实验中对热刺激引发的疼痛均具有良好的耐受性。其中剂量为60 mg/kg的鸡屎藤苷酸甲酯对化学和热刺激引发的疼痛具有极其显著的抑制作用。在小鼠戊巴比妥钠延长睡眠时间实验和小鼠体内温度测定实验中，该化合物未能延长小鼠戊巴比妥钠引发的睡眠时间和影响受试小鼠的体温改变，这些结果表明鸡屎藤苷酸甲酯的镇痛活性与催眠作用和药物毒性作用无关，具有特异性。另外，在小鼠热板镇痛药理拮抗实验中，此镇痛药理活性对药理拮抗工具药纳络酮和尼莫地平的拮抗作用不敏感，而完全被亚甲基蓝、L-NAME、格林本脲的拮抗作用拮抗；表明了鸡屎藤苷酸甲酯的镇痛药理活性可能与NO-cGMP-K+-ATP channels途径有关。

目录

文摘

英文文摘

声明

前 言

第一章中药鸡屎藤的本草考证

第二章 中药鸡屎藤总提物的镇痛药理活性研究

第三章 中药鸡屎藤各部位化学成分与镇痛药理活性研究

第一节 正丁醇部位的化学成分与镇痛药理活性研究

一、正丁醇部位化学成分研究

二、正丁醇部位镇药理活性研究

第二节 石油醚部位的化学成分与镇痛药理活性研究

第四章 鸡屎藤苷酸甲酯的镇痛药理活性研究

第五章 研究总结

鸡尿藤属植物化学成分与药理活性研究进展

参考文献

在读期间发表论文及科研成果

致 谢

附图