塞来昔布对兔角膜热烧伤后新生血管中MMP--2,MMP--9表达影响的研究

摘要

研究目的: 1.观察塞来昔布对兔角膜热烧伤后新生血管的生长情况的影响，探讨塞来昔布对角膜新生血管的抑制作用。 2.比较塞来昔布与羊膜移植对兔角膜热烧伤后新生血管的影响，为临床上用塞来昔布治疗角膜新生血管提供理论依据。 3.检测局部使用塞来昔布对兔角膜热烧伤后新生血管中的MMP-2，MMP-9表达的影响，研究塞来昔布抑制角膜新生血管的可能作用机制。 研究方法: 1.选取健康新西兰大白兔28只。将兔随机分为(A，B，C，D)四组，A组:新生血管对照组（8只），B组:8mg塞来昔布组（8只），C组:12mg塞来昔布组（8只），D组:空白对照组（4只）。A，B，C三组用角膜热烧伤法制作兔新生血管模型。对比制模后第4天、7天、14天在裂隙灯显微镜下所观察到的各组角膜的组织形态及新生血管的生长状况，并测算角膜新生血管生长面积;利用SPSS19.0统计软件包对数据进行分析，计量资料用(X)±S表示，各时间点各自新生血管面积的比较应用重复测量数据的方差分析，显著性水平α=0.05。 2.选取健康新西兰大白兔24只。将兔随机分为(A，B，C)三组，A组:新生血管对照组（8只），B组:塞来昔布组（8只），C组:羊膜移植组（8只）。A，B，C三组按角膜热烧伤法制作兔新生血管模型。对比制模后第15天、30天在裂隙灯显微镜下所观察到的各组角膜的组织形态及新生血管的生长状况，并测算角膜新生血管生长面积;利用SPSS19.0统计软件包对数据进行分析，计量资料用(X)±S表示，各时间点各自新生血管面积的比较应用重复测量数据的方差分析，显著性水平α=0.05。 3.选取健康新西兰大白兔44只。将兔随机分为(A，B，C)三组，A组:新生血管对照组（20只），B组:塞来昔布组（20只），C组:空白对照组（4只）。A，B两组按角膜热烧伤法制作兔角膜新生血管模型。各组于制模成功后第1、4、7、14、28天处死，沿角膜缘取双眼的角膜组织，垂直中轴线分为两等份，一份应用4％中性甲醛固定，另一份匀浆后离心，取上清液，酶联免疫吸附测定法检测各组角膜组织上清液中MMP-2，MMP-9的浓度。利用SPSS19.0统计软件包对数据进行分析，计量资料用(X)±S表示，MMP-2，MMP-9的浓度组间比较应用独立样本t'检验;各时间点的比较应用析因设计资料的方差分析;相关性分析应用Pearson相关系数。显著性水平α=0.05。 结果: 1.制模后第4、7、14天，新生血管面积（(X)±S）:新生血管对照组分别为（11.32±1.11）mm2、(38.49±4.64)mm2、(43.30±4.39)mm2;8mg塞来昔布组分别为(9.69±1.30)mm2、(31.15±4.85)mm2、(37.19±5.27)mm2;12mg塞来昔布组分别为(8.33±1.23)mm2、(30.31±4.93)mm2、(36.69±3.54)mm2;正常组未见新生血管。三组之间比较差异具有显著性的统计学意义，8mg塞来昔布组及12mg塞来昔布组的新生血管面积明显低于新生血管对照组，P＜0.05，8mg塞来昔布组与12mg塞来昔布组新生血管面积无明显差异，P＞0.05。三组各时间点之间的新生血管面积差异具有显著性的统计学意义，P＜0.05。 2.制模后第15天、30天，新生血管面积（(X)±S）:新生血管对照组分别为（43.22±4.35）mm2、(37.53±4.57)mm2;塞来昔布组分别为:（36.80±3.60）mm2、(28.61±3.93)mm2;羊膜移植组分别为:（37.07±5.2）mm2、(30.43±5.17)mm2;三组之间比较差异具有显著性的统计学意义，塞来昔布组及羊膜移植组的新生血管面积明显低于新生血管对照组，P＜0.05，塞来昔布组与羊膜移植组新生血管面积无明显差异，P＞0.05。三组各时间点之间的新生血管面积差异具有显著性的统计学意义，P＜0.05。 3.各时间点，新生血管对照组中MMP-2的表达浓度分别是(19.687±7.583)μg/L、(40.728±4.258)μg/L、(101.314±12.695)μg/L、（83.724±9.848）μg/L、（34.986±7.318）μg/L; MMP-9的表达浓度(15.137±3.806)μg/L、(32.583±7.513)μg/L、(76.798±8.495)μg/L、（53.063±8.248）μg/L、（34.596±7.469）μg/L;塞来昔布组中MMP-2的表达浓度分别是（13.610±5.527）μg/L、（34.505±10.201）μg/L、(78.546±15.042)μg/L、(59.460±4.826)μg/L、(29.291±5.668)μg/L;MMP-9的表达浓度（13.016±2.752）μg/L、（22.759±5.005）μg/L、（56.932±7.823）μg/L、（36.266±5.024）μg/L、（23.876±5.917）μ g/L。两组之间MMP-2的浓度表达差异具有显著性的统计学意义(F=42.093，P=0.000)，不同时间点的差异具有显著性的统计学意义(F=181.405，P=0.000)，时间与部位之间存在显著地交互效应(F=4.598，P=0.002);两组之间MMP-9的浓度表达差异具有显著性的统计学意义(F=66.889，P=0.000)，不同时间点的差异具有显著性的统计学意义(F=154.135，P=0.000)，时间与部位之间存在显著地交互效应(F=4.484，P=0.003)。相关性分析得出两者存在高度正相关(r=0.902，P=0.000)。 结论: 1.角膜热烧伤后局部应用塞来昔布具有明显抑制新生血管的作用。 2.角膜热烧伤后局部应用塞来昔布抑制新生血管的作用，与羊膜移植术没有显著性差异。 3.角膜热烧伤后局部应用塞来昔布抑制新生血管的机制可能与抑制MMP-2，MMP-9活化及表达有关。

目录

声明

摘要

缩略词表

前言

参考文献

第一部分 兔角膜热烧伤后局部应用Celecoxib对新生血管抑制作用的初步观察

前言

一、资料与方法

一、结果

三、讨论

四、结论

参考文献

第二部分 兔角膜热烧伤后局部应用Celecoxib与羊膜移植在抑制新生血管作用的对比研究

前言

一、资料与方法

二、结果

三、讨论

四、结论

参考文献

第三部分 兔角膜热烧伤后局部应用Celecoxib对新生血管中MMP-2，MMP-9表达的影响研究

前言

一、资料与方法

二、结果

三、讨论

四．结论

参考文献

附录

综述 MMPs与眼部新生血管性疾病

读期学位间发表论文和参加科研工作情况说明

致谢