几丁糖电纺膜防脑脊液漏的实验研究

摘要

目的：1.研究自行研制的几丁糖电纺膜防脑脊液漏的即刻效果;2.研究自行研制的几丁糖电纺膜防脑脊液漏的远期效果;3.研究几丁糖电纺膜完全修复缺损后，几丁糖电纺膜下方新生纤维组织膜与健康硬脑膜的差异。 方法：1.健康成年的新西兰家兔5只，取头部正中切口在双侧颅顶部对称开直径约1.2cm大小的圆形骨窗;剪去0.8 mm×0.8mm大小的硬脑膜组织，并将合适大小的几丁糖膜置入实验侧硬膜缺损区;对照侧仅行硬脑膜切除而不行硬脑膜修补以作对照;再于颅骨中线处钻一小孔，透明导管通过小孔置入硬膜下，见脑脊液从导管中反流，缓慢推入美蓝溶液，试验共重复了5次。2.健康成年的新西兰家兔40只，取头部正中切口在双侧颅顶部对称开直径约1.2cm大小的圆形骨窗;剪去0.8 mm×0.8mm大小的硬脑膜组织，并将合适大小的几丁糖膜置入实验侧硬膜缺损区;对照侧仅行硬脑膜切除而不行硬腑膜修补以作对照，缝合皮下及皮肤后进行饲养，术后自第2周开始每周处死2只，直至16周，观察骨窗周围大体情况及几丁糖膜吸收情况;术后第3w、第6周另外处死5只动物，显微镜下观察几丁糖电纺膜膜周围组织病理学改变、免疫组化切片中EGFR和bFGF表达情况。3.健康成年的新西兰家兔16只，取头部正中切口，在双侧颅顶部对称开直径约1.2cm大小的圆形骨窗;剪去0.8mm×0.8mm大小的硬脑膜组织，并将合适大小的几丁糖膜置入实验侧硬膜缺损区;对照侧不行硬脑膜切除作对照，缝合皮下及皮肤后进行饲养，术后8周（8周后硬膜已完全重建）处死，观察骨窗周围大体情况，通过组织学检验及电镜观察几丁糖膜下方新生纤维膜与正常硬膜差异。 结果：1.几丁糖电纺膜与缺损的骨窗以及硬膜周围组织黏附性好，能牢靠的封堵损伤创面，注射美蓝后，实验侧无美蓝渗出，即使膜的下方聚集大量美蓝也未见从粘贴边缘露出，而对照侧美蓝一直处于渗出状态。2.(1)、术后见皮肤及皮下无红肿、无渗出、化脓等炎症反应;几丁糖膜被严密包裹;从正中线切开包裹组织，见膜周围无粘连，容易被取出;膜下有新生纤维膜形成，严密封闭脑组织，无脑脊液漏;新生纤维膜与脑组织无粘连。(2)、HE染色提示实验组可见炎性细胞浸润较对照组少，统计学显示，3周及6周实验组与对照组炎症细胞计数有显著性差异。毛细血管及肉芽组织增生较对照组多;实验组胶原纤维大量增生早，组织修复早，对照组组织修复晚。(3)、masson染色提示实验组见大量纤维素，胶原纤维增生，排列整齐，几丁糖膜于周围胶原纤维有较清晰界限;对照组见纤维素较少，胶原纤维紊乱，无明显规律，提示几丁糖膜促进周围组织胶原化。(4)、免疫组化:提示实验组见bFGF及EGF高表达，提示成纤维细胞和内皮细胞活跃，对照组见bFGF低表达，EGF低表达。提示几丁糖膜促进创伤组织愈合。3.(1)、术后见皮肤及皮下无红肿、无渗出、化脓等炎症反应;几丁糖膜被严密包裹;从正中线切开包裹组织，见膜周围无粘连，容易被取出;膜下有新生纤维膜形成，严密封闭脑组织，无脑脊液漏;新生纤维膜与脑组织无粘连;(2)、新生纤维膜组织与正常硬膜对比:HE染色提示实验组术后8w几丁糖膜下新生纤维膜为纤维结缔组织;masson提示其中大量纤维素及胶原形成;免疫组化提示新生纤维膜已完全成熟，无bFGF表达，未见EGF表达，为完全成熟的纤维结缔组织;电镜观察新生纤维膜镜下见大量胶原纤维及成纤维细胞排列整齐，成纤维细胞核成熟，与正常硬膜相似度极高，与正常硬脑膜无明显差异。 结论：1.几丁糖电纺膜组明显优于空白对照组，有明确的封堵脑脊液效果;2.几丁糖电纺膜组明显优于空白对照组，远期预防脑脊液漏效果明确;3.新型几丁糖膜修补硬脑膜效果确切，且新生纤维膜与正常脑膜无明显差异。

目录

声明

摘要

缩略词表

第一部分 几丁糖电纺膜封堵脑脊液漏即刻效果的实验观察

前言

1 材料与方法

结果

讨论

参考文献

第二部分 几丁糖电纺膜预防脑脊液漏远期效果实验研究

前言

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

参考文献

第三部分 几丁糖电纺膜完全修复硬膜后与正常硬膜对比研究

前言

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

参考文献

综述 浅述硬膜缺损后人工硬膜修补方法及材料的应用现状

全文总结

在读期间的科研活动及获得的荣誉

致谢