功能化树形高分子共递送5-FU和TRAIL基因治疗乳腺癌骨转移的初步研究

摘要

目的:
　　乳腺癌作为一种常见的恶性肿瘤，它的发病常与遗传、年龄和激素水平等因素相关，且99％发生在女性，发病率约占全身各种肿瘤的15％，因而严重威胁女性的健康。目前，临床上治疗乳腺癌通常采用手术切除为主的综合治疗。随着综合治疗手段的丰富，在乳腺癌晚期患者中，骨转移的发生率约为70％，乳腺癌骨转移术后患者也需进行正规的内科治疗。然而，越来越多的分子生物学及细胞生物学研究表明，乳腺癌细胞本身所具有的特异性和复杂性，使得单纯的术后化疗很难彻底的将其根治。肿瘤细胞的多药耐药性一直是癌症治疗中面临的科学难题。针对肿瘤多药耐药性，有效的载体亟待研究开发。树形高分子作为近十年发展起来的一种新型载体材料，因其特殊的结构特点已被越来越多的应用到生物医学领域。越来越多的研究者把树形高分子材料作为药物或基因载体进行了深入研究。本研究计划通过制备高效、可控的树形高分子载体，对抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶和TRAIL基因共递送对MDA-MB-231细胞协同发挥作用。
　　方法:
　　本实验提出了一种基于香豆素修饰的低代数树形高分子的紫外光照刺激响应多功能纳米载体系统，用于递送抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶和TRAIL基因治疗乳腺癌，具体方法步骤如下:
　　(1)通过化学修饰的方法将香豆素连接到低代数树形高分子G1表面形成树形高分子-香豆素聚集体;表征该聚集体及其相关复合物;评估该聚集体对5-氟尿嘧啶的载药能力，以及对紫外光的响应;评估紫外光照对该聚集体在细胞中转染效率的影响;评估5-氟尿嘧啶对该聚集体在细胞中转染效率的影响。
　　(2)探索树形高分子-香豆素聚集体作为载体在乳腺癌细胞中转染治疗基因TRAIL所需的相对最适量;探索聚集体作为载体在紫外光控条件下，对不同浓度的5-氟尿嘧啶进行转载和释放，并研究对乳腺癌细胞的抑制作用;研究该聚集体在紫外光控条件下作为5-氟尿嘧啶和TRAIL基因的载体协同抑制乳腺癌细胞的治疗效果。
　　结果:
　　(1)通过化学修饰的方法形成的树形高分子-香豆素聚集体可形成合适的纳米颗粒;透射电子显微镜、动态光散射、一维核磁技术均证实纳米颗粒的存在;紫外光照可以控制聚集体对5-氟尿嘧啶的装载和释放;紫外光照和5-氟尿嘧啶均不影响聚集体在细胞中的转染效率。
　　(2)分别探索出聚集体作为载体的相对最适量，紫外光照条件下载体装卸5-氟尿嘧啶抑制细胞的最适药物浓度;5-氟尿嘧啶和TRAIL基因可以协同抑制乳腺癌细胞，同时，紫外光控的载体可以控制5-氟尿嘧啶的装载和释放，在协同治疗中实现对5-氟尿嘧啶的按需调控。
　　结论:
　　利用协同治疗的方法将化疗与基因治疗相联合应用可以有效提高治疗效果，这种紫外光照可逆响应、可控的多功能纳米载体在体外共递送5-FU和TRAIL基因协同抑制乳腺癌细胞是可行的，为基于树形高分子的多功能纳米载体在乳腺癌骨转移的协同治疗中的应用打下坚实的理论基础。

目录

声明

摘要

缩略词表

前言

第一部分 G1-CM1的制备与表征以及相关影响因素分析

一、实验材料及方法

二、结果

三、讨论与总结

第二部分 G1-CM1共递送5-氟尿嘧啶和TRAIL基因对乳腺癌细胞的抑制作用

一、实验材料及方法

二、结果

三、讨论

总结与展望

文献综述 含氟药物的相关研究进展

参考文献

在读期间发表论文和参加科研工作情况

致谢